坏死性凋亡

摘要： 背景:骨关节炎与慢性、低度炎症密切相关。坏死性凋亡是一种具有广泛炎症特性的新型细胞死亡途径,可影响骨关节炎进展,但目前尚未发现骨关节炎坏死性凋亡的相关靶点。目的:基于生物信息学挖掘骨关节炎坏死性凋亡关键基因,并利用动物实验加以验证,为从坏死性凋亡角度防治骨关节炎提供新的靶点。方法:分别从GEO数据库与GeneCards数据库筛选出骨关节炎相关基因和坏死性凋亡相关基因,继而对两者取交集获得骨关节炎坏死性凋亡基因,进一步进行GO及KEGG富集分析,构建PPI网络,通过Cytoscape软件的5种计算方法获得骨关节炎坏死性凋亡关键基因(Hub基因),最后选用雄性SD大鼠建立膝关节骨关节炎中期模型,通过RT-PCR检测Hub基因在SD大鼠骨关节炎中期模型中的表达情况。结果与结论:①共筛选出38个骨关节炎坏死性凋亡基因,GO及KEGG分析发现其主要在白细胞活性、T细胞受体及白细胞介素17信号通路等方面显著富集;通过Cytoscape的5种不同算法筛选出CYBB、FADD、IL1B、MYC及EGFR 5个Hub基因;②RT-PCR检测结果显示,与正常对照组比较,雄性SD大鼠骨关节炎中期模型软骨中EGFR、IL1B基因呈高表达(P0.05);③结果显示,CYBB、IL1B、MYC及EGFR可作为骨关节炎坏死性凋亡的关键基因,有望成为防治骨关节炎的新靶点。

摘要： 背景:哺乳动物中枢神经系统损伤依赖N6-甲基腺苷(m^(6)A)的调节,并与坏死性凋亡密切相关。目前在大鼠创伤性颅脑损伤中,m^(6)A RNA甲基化修饰与创伤性颅脑损伤坏死性凋亡的关系尚未被研究。目的:探讨m^(6)A RNA甲基化修饰与创伤性颅脑损伤大鼠坏死性凋亡的关系,为颅脑损伤坏死性凋亡的发生发展及预后的分子机制提供实验依据。方法:选取SPF级SD雄性大鼠30只,随机分为假手术组、创伤性颅脑损伤组和NSC118218(STAT1抑制剂)组,各10只。后2组通过改良Feeney法建立颅脑损伤模型,假手术组仅暴露脑硬膜,不进行颅脑打击。颅脑损伤6 h后检测各组大鼠大脑皮质炎症因子肿瘤坏死因子ɑ、白细胞介素6、白细胞介素1β、白细胞介素10和高迁移率族蛋白B1表达水平以及脑含水量,检测YTH结构域家族蛋白2、总m^(6)A RNA甲基化修饰水平、STAT1和JAK1的表达水平。结果与结论:①创伤性颅脑损伤组和NSC118218组炎症因子水平和脑含水量明显高于假手术组,m^(6)A RNA甲基化修饰比例和YTHDF2表达水平明显低于假手术组,JAK1和STAT1的表达水平明显高于假手术组(P<0.05);②与创伤性颅脑损伤组相比,NSC118218组炎症因子水平和脑含水量明显降低,m^(6)A RNA甲基化修饰比例和YTH结构域家族蛋白2表达水平明显升高,JAK1和STAT1的mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);③提示颅脑损伤后m^(6)A RNA甲基化修饰比例降低,YTH结构域家族蛋白2表达水平下降,激活JAK/STAT信号通路,增加JAK1和STAT1的表达,促进细胞坏死性凋亡。

摘要： 近年来,许多研究揭示了坏死性凋亡在脑卒中疾病中被激活,并在其发病机制中起着至关重要的作用。此外,一系列研究发现,基因或药物抑制坏死性凋亡在体外和体内对脑卒中都有神经保护作用,提示坏死性凋亡可能是治疗脑卒中的潜在靶点。本文就目前坏死性凋亡及其与脑卒中的相关性研究进行综述。

摘要： 目的探讨γ射线照射引起的心肌细胞死亡方式及其线粒体损伤效应。方法用;Coγ射线单次照射大鼠H9C2心肌细胞,按照射后时间分为照射后24,48和72 h组,按照射剂量分为细胞对照组及5,10和20 Gy组。用CCK-8试剂盒检测细胞存活率;APC-AnnexinⅤ/7AAD凋亡试剂盒检测细胞凋亡;Western印迹法检测细胞凋亡标志物——活化的胱天蛋白酶3和胱天蛋白酶原3及坏死性凋亡标志物——受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)、RIPK3、磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域(p-MLKL)和线粒体酪氨酸磷酸化酶1(PTPMT1)蛋白表达水平;通过荧光探针H2DCF-DA标记,用流式细胞术检测细胞产生活性氧(ROS)水平;通过JC-1探针标记,分别用激光共聚焦显微镜和流式细胞术定性和定量检测细胞线粒体膜电位;通过钙黄绿素-AM探针标记,分别用激光共聚焦显微镜和流式细胞术定性和定量检测细胞线粒体膜通道孔(mPTP)开放状态。结果与细胞对照组相比,20 Gy照射各时间组及5和10 Gy照射48和72 h组H9C2细胞存活率降低(P<0.05);20 Gy照射各时间组H9C2细胞凋亡率显著增加(P<0.01),活化的胱天蛋白酶3水平升高(P<0.05);10 Gy照射48和72 h组H9C2细胞凋亡率增加(P<0.05),48 h组活化的胱天蛋白酶3水平升高(P<0.05)。20 Gy照射各时间组RIPK1,RIPK3和P-MLKL表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),ROS增加(P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.01),mPTP开放增加(P<0.01);10 Gy照射48 h组RIPK1,RIPK3和p-MLKL表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),各时间组ROS产生增加(P<0.05,P<0.01)且线粒体膜电位下降(P<0.05,P<0.01),48 h组mPTP开放增加(P<0.01)。5 Gy照射各时间组RIPK3表达水平显著升高(P<0.01),24 h组ROS产生增加(P<0.05),48 h组线粒体膜电位下降(P<0.05)且mPTP开放增加(P<0.05)。各照射剂量各时间组PTPMT1表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论γ射线照射可导致大鼠心肌细胞H9C2发生坏死性凋亡,并导致线粒体损伤及氧化应激水平升高,PTPMT1表达降低可能与该过程有关。

摘要： 目的探究在肾缺血再灌注损伤(IRI)模型中存在的细胞死亡形式。方法将24只Wistar大鼠随机分为4组:正常组(NC组)、假手术组(Sham组)、肾缺血组(RI组)、肾缺血再灌注组(RIR组)。RI组及RIR组通过钳夹双肾动脉行30min双肾动脉阻断,诱导肾缺血,RIR组阻断30min后松开钳夹恢复血流180min制成肾缺血再灌注模型。NC组不处理,Sham组开腹但不阻断双侧肾动脉。再灌注180min结束后收集血清和肾组织。免疫组化、免疫印迹法对肾组织中混合系列蛋白激酶样结构域蛋白(MLKL)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)进行定位及表达水平检测,TUNEL法分析肾小管细胞凋亡情况。定量分析超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化。结果TUNEL法显示肾脏细胞凋亡明显增加。Westem blot检测显示RIR组与NC组相比,MLKL表达上升,GPX4表达降低(P<0.05),免疫组化病理切片结果与其一致。SOD活力显著下降(P<0.05),MDA水平明显上升(P<0.05)。结论RIR模型中肾小管细胞死亡数增加,抗氧化能力下降,RIR中有坏死性凋亡(necroptosis)和铁坏死(ferroptosis)两种细胞死亡形式的参与。

摘要： 目的:利用高通量测序数据构建坏死性凋亡相关的非编码RNAs(miRNAs)在肾透明细胞癌(Clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)预后风险模型,为预测患者生存提供指导,此外还研究了下游分子机制、分子表达以及组织样本验证.方法:本研究利用高通量二代测序数据分析肾透明细胞癌坏死性凋亡相关miRNAs表达及临床信息,通过Cox比例风险回归分析来构建一个预后相关多分子miRNAs模型.分析差异的miRNA-mRNA-lncRNA绘制生存曲线探讨预后价值,对靶基因功能富集分析,以及蛋白互作、lncRNA共表达来探索坏死性凋亡相关miRNA潜在的作用机制.应用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR),在20个组织样本中检测miRNAs表达水平.结果:通过测序数据差异分析得到9个坏死性凋亡相关miRNAs,确定3个最佳预后坏死性凋亡相关的miRNAs(miR-425-5p,miR-223-3p和miR-7-5p).生存分析表明高风险组预后较差.通过Nomogram,可视化评估模型,风险评分可以作为独立预后因子.此外,通过调查可发现,坏死性凋亡miRNAs下游靶基因GO和KEGG通路富集与调节干细胞多能性的信号通路、MAPK信号通路有关.结论:坏死性凋亡相关miRNAs预后风险模型可以有效地指导肾透明细胞癌患者分层,对未来临床判断预后提供了有力的参考信息.此外,坏死性凋亡miRNAs下游靶基因NRAS、BEX4,及相关lncRNA为肾透明细胞癌中的进一步下游分子机制的研究提供生物信息学依据.

摘要： 目的探讨过表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因对小鼠缺氧性肾损伤的干预作用及可能机制。方法将15只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、缺氧组和过表达组,每组5只。给予过表达组小鼠注射过表达PPARγ基因的腺相关病毒,对照组和缺氧组小鼠则注射等量生理盐水。3周后将缺氧组和过表达组小鼠放入低压低氧动物实验舱进行缺氧干预7 d。干预结束后取各组小鼠肾组织,光镜下观察肾组织病理学变化,并采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组小鼠肾组织中PPARγ、混合谱系蛋白激酶结构域样蛋白(MLKL)、转化生长因子β(TGF-β)的mRNA和蛋白相对表达量。结果与对照组比较,缺氧组肾组织中部分肾小管细胞肿胀,管腔狭窄堵塞,PPARγ的mRNA和蛋白相对表达量均明显降低,MLKL和TGF-β的mRNA和蛋白相对表达量均明显增高(均P<0.05)。与缺氧组比较,过表达组肾组织中肾小管病变相对轻微,PPARγ的mRNA和蛋白相对表达量均明显增高,MLKL和TGF-β的mRNA和蛋白相对表达量均明显降低(均P<0.05)。结论过表达PPARγ基因可减轻小鼠缺氧性肾损伤,其机制可能与减少肾脏细胞坏死性凋亡有关。

摘要： 脓毒症是全球死亡的主要原因,脓毒症发病机制及治疗研究仍然面临很多难题。坏死性凋亡是一种新兴的细胞死亡形式,包括脓毒症、神经退行性疾病和缺血再灌注损伤等多种疾病的发生、发展被认为与其有关。本综述旨在探讨坏死性凋亡在脓毒症中的研究进展,为坏死性凋亡相关靶点的干预可能在脓毒症治疗中发挥重要作用提供理论依据。

摘要： 目的:探讨6-氢基多巴胺氢溴酸盐(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导帕金森病(parkinson's disease,PD)模型小鼠多巴胺能神经元坏死性凋亡的细胞机制。方法:将含0.02%抗坏血酸和0.9%生理盐水的6-OHDA注入开颅后的8周龄、健康雄性C57/BL小鼠的单侧黑质(substa ntia nigra,SN)区域构建PD小鼠模型(模型组),用APO旋尾实验和旷场实验验证PD小鼠模型的构建情况;取模型组小鼠脑组织进行免疫组化(immunohistochemistry,IHC)检测多巴胺能神经元(dopaminergic neurones,DA)标记物酪氨酸氢化酶(tyrosine hydroxylase,TH)恢复水平;通过qPCR和IHC检测模型组小鼠坏死性凋亡相关基因(FADD,RIPK1,TRADD)mRNA和蛋白表达水平。以左脑黑质区域只注入含0.02%抗坏血酸的0.9%生理盐水的小鼠作为正常对照组(假手术组)。结果:与对照组比较,6-OHDA组小鼠的旋转次数明显增加,跑动距离和平均速度明显减少(P<0.05),静止时间则明显增加(P<0.05);6-OHDA组小鼠纹状体区域(STR)和黑质区域(SN)的TH阳性表达均明显降低(P<0.01),其中STR中的致密神经树突纤维明显减少,SN中的DA神经元大量丢失,仅可见少量多巴胺能神经元细胞存留,残留的阳性神经元细胞胞体小,突起短;6-OHDA组小鼠RIPK1、FADD的基因和蛋白表达水平均明显增加。结论:6-OHDA可促进DA能神经元变性死亡,其可能机制是通过促进FADD-RIPK1坏死性凋亡信号通路。

摘要： 目的探讨伊立替康活性代谢物SN38对皮肤鳞状细胞癌细胞坏死性凋亡的调节机制。方法以A431细胞作为研究对象,分为正常对照组、SN38组、SN38+NEC-1组以及正常对照组、SN38组、SN38+shRNA组、SN38+shRIP3组。通过细胞增殖试验、流式细胞技术及蛋白质印迹法观察特异性坏死性凋亡抑制剂NEC-1和基因沉默RIP3(shRIP3)对SN38干预A431细胞的坏死性凋亡水平及蛋白表达水平的影响。结果SN38干预后A431细胞增殖能力降低,而当使用特异性坏死性凋亡抑制剂NEC-1后,其增殖能力较SN38组增强,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较,SN38组坏死性凋亡蛋白(RIP1/RIP3)表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。而当提前运用NEC-1或shRIP3干预A431细胞并暴露于SN38后,其坏死性凋亡蛋白表达水平较SN38组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。SN38组凋亡水平较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。而当提前运用NEC-1或者shRIP3干预A431细胞并暴露于SN38后,其凋亡水平较SN38组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SN38促进皮肤癌细胞坏死性凋亡的机制可能是通过RIP1/RIP3/PARP-1信号通路起到调节作用。

摘要： 通过体外实验,观察高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中的RIP1、RIP3和IL-6表达情况,探讨坏死性凋亡对HUVECs损伤的作用及机制.结果表明，高糖环境下，人脐静脉内皮细胞的RIP1与RIP3表达量均增加，说明细胞发生坏死性凋亡增加，该类程序化死亡可能进一步导致细胞炎症因子IL-6表达量增多，坏死性凋亡和IL-6相互作用，加重了人脐静脉内皮细胞的炎症反应和损伤。

摘要： 坏死性凋亡是新近提出的一种死亡方式，RIP1与RIP3为坏死性凋亡的两个关键分子。糖基化终末产物的生成、肿瘤坏死因子(TNF-)、脂代谢紊乱及氧化应激等因素参与了DN的发病。这些因素能够激活或诱导坏死性凋亡。因此，DN时坏死性凋亡途径可能被激活，进而引起肾脏固有细胞损伤、死亡和释放炎症介质，最终导致和加重糖尿病的肾脏损伤。而Nec-1是坏死性凋亡的特异性抑制剂，探索特异性的阻断RIP1酶活性进而阻断坏死性凋亡，进而起到保护糖尿病的肾脏免受损伤，对预防和治疗糖尿病肾病有重要的意义。

摘要： 目的:体外研究双氢青蒿素(DHA)对人肝星状细胞(HSCs)坏死性凋亡的影响及机制.rn 方法:HSCs分为对照组以及DHA处理组.应用噻唑蓝(MTT)、细胞计数试剂盒-8(CCK-8)以及亚甲基蓝染色检测HSCs的细胞活力.酶联免疫吸附实验检测HSCs培养基中HMGB1含量.Real-time PCR检测细胞内HMGB1 mRNA水平.细胞Titer-Glo试剂盒检测HSC内ATP含量.LDH试剂盒检测培养基中LDH含量.Real-time PCR和western blot分别检测受体相互作用蛋白l(RIPl)、RIP3和核因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA和蛋白水平.Western blot实验检测MLKL的磷酸化水平.免疫荧光实验观察HSC内Nrf2蛋白表达及亚细胞分布.rn 结果:DHA剂量依赖性地降低HSCs的活力.DHA剂量依赖性地促进HSCs释放HMGB1和LDH,升高HSCs内HMGB1的mRNA水平,降低细胞内ATP水平.DHA剂量依赖性地促进RIP1、RIP3的mRNA和蛋白表达,并促进MLKL的磷酸化.DHA以剂量依赖性的方式促进HSCs内Nrf2的mRNA和蛋白表达,并促进Nrf2从细胞质中向细胞核中转移.Nrf2 siRNA转染HSCs后可削弱DHA的上述作用,但Nrf2过表达质粒转染HSCs后可以模拟DHA的作用并与其产生协同效应.rn 结论:结果表明DHA可诱导HSCs的坏死性凋亡.这一作用可能与激活HSCs内Nrf2信号分子相关.本研究为DHA抗肝纤维化研究提供了新思路,同时为将DHA开发为坏死性凋亡相关的抗肝纤维化潜在药物提供了坚实的实验基础.

摘要： 目前对于细胞死亡认识又有新的发展，细胞死亡大多属于程序性细胞死亡(programmed celldeath, PCD )，即细胞死亡是由一系列基因控制并通过激活特定死亡信号通路完成的。根据细胞死亡的形态特征和分子机制不同，可将细胞死亡分为四种类型:①细胞凋亡(apoptosis )，也称I型PCD;②细胞自噬性死亡(autophagic cell death )，也称II}PCD;③细胞坏死(necrosis )，其中大部分坏死称为necropiosis，也称III型PCD;④角质化(Cornification )。其中necroptosis是新近确立的一种新的细胞死亡类型，中文称作“坏死性凋亡”或“程序性坏死”。本文necroptosis的发现、分子机制和病理生理意义分别进行了阐述。

摘要： 本发明属于医药技术领域，具体涉及坏死性细胞凋亡抑制剂GNF‑7及其作为药物的用途，特别是在制备坏死性细胞凋亡抑制剂及抗肿瘤、抗缺血性或顺铂诱导的急性肾损伤、抗阿尔茨海默病、抗缺血性心肌病、抗缺血性脑卒中、抗动脉粥样硬化、抗急性胰腺炎、抗儿童炎症性肠病、抗脓毒血症、抗沙门氏菌感染、抗李斯特菌感染、抗牛痘病毒感染等炎症和感染性相关疾病药物中的应用。

摘要： 本发明属于医药技术领域，具体涉及坏死性细胞凋亡抑制剂KW‑2449及其作为药物的用途，特别是在制备坏死性细胞凋亡抑制剂及抗肿瘤、抗缺血性或顺铂诱导的急性肾损伤、抗阿尔茨海默病、抗缺血性心肌病、抗缺血性脑卒中、抗动脉粥样硬化、抗急性胰腺炎、抗儿童炎症性肠病、抗脓毒血症、抗沙门氏菌感染、抗李斯特菌感染、抗牛痘病毒感染等炎症和感染性相关疾病药物中的应用。

摘要： 本发明属于医药技术领域，具体涉及坏死性细胞凋亡抑制剂GNF‑7及其作为药物的用途，特别是在制备坏死性细胞凋亡抑制剂及抗肿瘤、抗缺血性或顺铂诱导的急性肾损伤、抗阿尔茨海默病、抗缺血性心肌病、抗缺血性脑卒中、抗动脉粥样硬化、抗急性胰腺炎、抗儿童炎症性肠病、抗脓毒血症、抗沙门氏菌感染、抗李斯特菌感染、抗牛痘病毒感染等炎症和感染性相关疾病药物中的应用。

摘要： 本发明属于医药技术领域，具体涉及坏死性细胞凋亡抑制剂KW‑2449及其作为药物的用途，特别是在制备坏死性细胞凋亡抑制剂及抗肿瘤、抗缺血性或顺铂诱导的急性肾损伤、抗阿尔茨海默病、抗缺血性心肌病、抗缺血性脑卒中、抗动脉粥样硬化、抗急性胰腺炎、抗儿童炎症性肠病、抗脓毒血症、抗沙门氏菌感染、抗李斯特菌感染、抗牛痘病毒感染等炎症和感染性相关疾病药物中的应用。

摘要： 本发明公开了基于坏死性凋亡相关基因组合构建的模型在制备预测低级别胶质瘤预后产品中的应用，本发明采用坏死性凋亡相关基因：BID、H2AFY2、MAPK9、TNFRSF10B作为检测靶标，构建的模型预测性能良好；构建结合坏死性凋亡相关基因风险评估模型和临床因素的列线图对生存率具有更高的预测性能,对模型中的高风险和低风险在免疫浸润方面的差异比较和预后模型对预后治疗的用药指导有望将基于坏死性凋亡相关基因构建的模型用于LGG患者预后和免疫治疗反应的临床预测。

摘要： 本发明属于生物医药领域，涉及大麻素受体药物的新用途，具体涉及1型大麻素受体(CB1R)拮抗剂及2型大麻素受体(CB2R)激动剂在制备治疗心肌细胞坏死性凋亡药剂中的应用。本发明还提供了相应的试剂盒。喹硫平是一种常见的非典型抗精神病药，用于治疗精神分裂症，双相情感障碍和重度抑郁症等精神障碍。本发明经实验证实，喹硫平促使心肌细胞炎性浸润及纤维化重构，喹硫平具有促进RIP3及MLKL的作用，激活心肌细胞坏死性凋亡通路，而1型大麻素受体(CB1R)拮抗剂及2型大麻素受体(CB2R)激动剂可显著抑制坏死性凋亡通路，从而用于治疗喹硫平心肌毒性。本发明提供了1型大麻素受体(CB1R)拮抗剂及2型大麻素受体(CB2R)激动剂的新应用，本发明为心肌细胞毒性治疗药物的开发提供了新的参考数据。

摘要： 本发明涉及一种抑制坏死性凋亡的新型式(I)杂环化合物及其使用方法。所述化合物可用于治疗与失调的坏死性凋亡有关的病症。

摘要： 本发明涉及抑制坏死性凋亡的方法；鉴定抑制坏死性凋亡的化合物的筛选方法；以及用于抑制坏死性凋亡的化合物，其可用于治疗与失调坏死性凋亡相关的症状。

摘要： 本申请涉及坏死性凋亡的小分子抑制剂。本发明描绘了一系列抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱发的坏死性凋亡的杂环化合物。本发明的杂环化合物由式(I)-(VIII)以及化合物(1)-(7)、(13)-(26)、(27)-(33)、(48)-(57)和(58)-(70)描述。这些坏死性凋亡抑制剂显示出抑制TNF-α在人类Jurkat T细胞的FADD缺失变体中诱发的坏死性凋亡。本发明还描绘了以坏死性凋亡抑制剂为特色的药物组合物。本发明的化合物还可用于治疗坏死性凋亡很可能起重要作用的疾病。

摘要： 本发明描绘了一系列抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱发的坏死性凋亡的杂环化合物。本发明的杂环化合物由式(I)-(VIII)以及化合物(1)-(7)、(13)-(26)、(27)-(33)、(48)-(57)和(58)-(70)描述。这些坏死性凋亡抑制剂显示出抑制TNF-α在人类JurkatT细胞的FADD缺失变体中诱发的坏死性凋亡。本发明还描绘了以坏死性凋亡抑制剂为特色的药物组合物。本发明的化合物还可用于治疗坏死性凋亡很可能起重要作用的疾病。