丹参酮ⅡA

摘要： 背景:人早孕蜕膜间充质干细胞及丹参酮ⅡA具有抗粘连作用,均对宫腔粘连有一定疗效,但其具体机制待进一步研究.目的:探索人早孕蜕膜间充质干细胞联合丹参酮ⅡA治疗宫腔粘连的效果及机制.方法:采用胶原酶Ⅰ消化法分离培养人早孕蜕膜间充质干细胞,选取45只雌性4-6周龄SD大鼠,随机分为5组,每组9只,分别为对照组、模型组、丹参酮组、干细胞组及联合治疗组.对照组进行假手术;模型组进行机械刮宫造模后不干预;干细胞组则在造模后7 d经宫旁注射0.2 mL人早孕蜕膜间充质干细胞悬液(1×109 L-1),每隔3 d注射1次,共3次;丹参酮组在造模后7 d灌胃11 mg/(kg·d)丹参酮ⅡA溶液,持续灌胃1周;联合治疗组则为上述两种治疗方式的联合运用.对照组及模型组在术后5,10,15 d取材,各治疗组则在最后一次治疗后5,10,15 d后取材,苏木精-伊红染色、Masson染色观察受损子宫的愈合程度;ELISA检测血清雌激素E2及血管内皮生长因子水平;q-PCR法检测子宫组织中miR-29a mRNA表达;Western blot检测子宫组织转化生长因子β1、Smad3及基质金属蛋白酶9蛋白表达.结果 与结论:①与对照组比较,模型组大鼠子宫内膜纤维化面积比显著增加(P<0.05),而内膜厚度及腺体数量显著下降(P<0.05);与模型组比较,联合治疗组大鼠子宫内膜纤维化面积比显著下降(P<0.05),而内膜厚度及腺体数量显著增加(P<0.05),干细胞组及丹参酮组大鼠子宫内膜纤维化面积比也显著下降(P<0.05);②与模型组比较,丹参酮组、干细胞组及联合治疗组血清雌激素E2水平显著升高(P<0.05),血管内皮生长因子水平显著下降(P<0.05),miR-29a mRNA表达显著升高(P<0.05),联合治疗组转化生长因子β1、Smad3蛋白表达明显下降(P<0.05),丹参酮组基质金属蛋白酶9蛋白表达明显上升(P<0.05);③结果 表明,人早孕蜕膜间充质干细胞与丹参酮ⅡA联合治疗可有效修复大鼠子宫内膜,其机制可能通过调控miR-29a降低转化生长因子β1、Smad3蛋白水平,进而改善纤维化.

摘要： 丹参作为我国的传统中药,广泛用于临床多种病、证的治疗及配伍应用。丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA,TⅡA)是从丹参中提取的一种菲醌类衍生物,为丹参发挥药理作用的主要活性成分之一,具有多种药理活性,在心血管疾病治疗、抗炎、抗肿瘤、肝保护、神经保护等方面均发挥显著药效。近年来,其广泛的免疫调节作用受到了人们的关注,发现TⅡA可干预免疫细胞的激活、发育及其功能。其中,文献报道最多的免疫细胞主要有中性粒细胞、巨噬细胞、肥大细胞、树突状细胞、T淋巴细胞等。本文从免疫学的角度分析TⅡA对上述免疫细胞的调节作用,并探讨其对炎症性疾病、动脉粥样硬化、过敏性疾病、免疫性疾病等产生防治作用的免疫机制。

摘要： 阿托伐他汀和丹参酮ⅡA在临床上已用于治疗动脉粥样硬化。然而,两者联用治疗动脉粥样硬化的协同作用仍不明确。为了考察丹参酮ⅡA联合阿托伐他汀能否增强阿托伐他汀对动脉粥样硬化大鼠的治疗效果,将大鼠随机分为正常对照组、模型组、丹参酮ⅡA低剂量组(7 mg/kg)、丹参酮ⅡA中剂量组(21 mg/kg)、丹参酮ⅡA高剂量组(63 mg/kg)、阿托伐他汀组(7 mg/kg)、丹参酮ⅡA低剂量(7 mg/kg)+阿托伐他汀(7 mg/kg)组、丹参酮ⅡA中剂量(21 mg/kg)+阿托伐他汀(7 mg/kg)组。除正常对照组外,其余大鼠采用连续4 d腹腔注射300000 IU/(kg·d)维生素D3配合高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化模型。造模16周后,检测各组大鼠血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量;同时,通过苏木精-伊红染色观察腹主动脉病理学变化。结果显示,联合用药组能显著降低动脉粥样硬化大鼠血清中TC、TG、LDL-C含量(P<0.01);高剂量的丹参酮ⅡA和阿托伐他汀均能明显抑制腹主动脉内膜增厚,中剂量的丹参酮ⅡA联合阿托伐他汀组抑制效果最强(P<0.01)。上述结果表明,丹参酮ⅡA联合阿托伐他汀对动脉粥样硬化大鼠具有更好的治疗效果。

摘要： 目的探索丹参酮ⅡA(TⅡA)改良间充质干细胞(MSC),从而增加MSC对神经炎症的抑制作用。方法首先比较MSC和TⅡA-MSC培养上清的外泌体,通过电镜及流式检测粒径和浓度。然后采用Transwell共培养系统以1∶1的比例接种N9细胞和MSC,分为对照组、LPS(1μg/mL)组、LPS+MSC(1μg/mL LPS+MSC)组、LPS+TⅡA-MSC(1μg/mL LPS+TⅡA-MSC)组、LPS+TⅡA-MSC+TREM2 siRNA(1μg/mL LPS+TⅡA-MSC+TREM2 siRNA)组,用Western blot检测IL-1β、IL-6和TNF-α的变化。结果TⅡA-MSC的外泌体含量高于MSC(P=0.038)。与LPS组相比,LPS+MSC组IL-6(P=0.014)和TNF-α(P=0.044)表达下调;LPS+TⅡA-MSC组IL-1β(P=0.002)、IL-6(P<0.001)和TNF-α(P=0.003)表达下调,而TⅡA-MSC对炎症因子的下调作用更显着。与LPS+MSC组相比,LPS+TⅡA-MSC组IL-6显着降低(P<0.001)。而使用TREM2 siRNA沉默MSC的TREM2基因后,TⅡA-MSC降低N9细胞炎症因子的能力减弱,与LPS+TⅡA-MSC组相比,TREM2 siRNA可显着减弱IL-6(P=0.005)和TNF-α(P=0.033)的降低。结论TⅡA-MSC抑制LPS诱导的N9细胞炎症反应的优越性与增加外泌体分泌,调控TREM2信号通路有关。

摘要： 目的研究丹参酮IIA(Tan IIA)是否增敏顺铂(cDDP)对肺癌细胞的杀伤作用,以及初步探讨其可能的机制。方法H2009细胞分为对照组,Tan IIA单药组,cDDP单药组以及Tan IIA+cDDP联合用药组。处理细胞48~72 h,生长期末在显微镜下观察细胞凋亡情况,CCK-8实验检测细胞抑制率,以流式细胞仪检测细胞凋亡情况,以蛋白质印迹法检测细胞的凋亡相关蛋白Cleaved-Caspase3的表达水平。结果分别以cDDP(3、6、9μM)联合Tan IIA(1μM)处理H2009细胞后,联合用药组抑制率(53.05%)较单药组明显增加(P<0.05),同样,Tan IIA(1、2、3μM)联合cDDP(9μM)处理H2009后,联合用药组抑制率(57.47%),与两单药组相比,明显增加(P<0.05);流式细胞术发现Tan IIA(1μM)联合cDDP(9μM)处理H2009细胞后,早期和晚期的细胞凋亡率较对照组及两个单药组明显增加(35.9%vs.8.6%、20.0%;7.9%vs.1.7%、2.7%),表明Tan IIA可显著增强cDDP诱导的细胞凋亡;进一步通过western blot研究发现,联合用药组中Cleaved-Caspase3蛋白表达明显增高,表明Tan IIA可能是通过上调Cleaved-Caspase3的表达而促进了肿瘤细胞的凋亡,以上研究结果差异均有统计学意义。结论TanⅡA可增敏cDDP对肺癌细胞H2009的杀伤作用,且呈剂量-时间依赖性,其可能机制是促进了Cleaved-Caspase3凋亡蛋白的表达。

摘要： 目的研究丹参酮ⅡA对ApoE^(-/-)小鼠冠心病伴抑郁的影响及作用机制。方法采用高脂饲料喂养ApoE^(-/-)小鼠,并进行慢性不可预知温和应急(CUMS)构建冠心病伴抑郁小鼠模型。将小鼠随机分为正常组、模型组、丹参酮ⅡA低剂量组(30 mg·kg^(-1))和丹参酮ⅡA高剂量组(60 mg·kg^(-1))。采用HE和油红O染色检测ApoE^(-/-)小鼠心脏主动脉窦的病理变化;强迫游泳实验(FST)、悬尾实验(TST)和糖水偏好实验(SPT)观察ApoE^(-/-)小鼠抑郁样行为;ELISA法检测小鼠血脂及炎症因子水平;Western blot检测心脏主动脉窦组织和海马组织的炎症相关蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组ApoE^(-/-)小鼠心脏主动脉内膜脂质积累显著增加,血脂及促炎因子显著升高(P<0.01),FST和TST不动时间显著增加(P<0.01),SPT蔗糖偏好率显著降低(P<0.01),心脏主动脉窦组织和海马组织中p-GSK3β(Ser9)/GSK3β、p-CREB(Ser133)/CREB和p-NF-κB/NF-κB的比值显著增加(P<0.01)。与模型组相比,丹参酮ⅡA高、低剂量组ApoE^(-/-)小鼠心脏主动脉内膜脂质积累显著减少,血脂及促炎因子水平显著降低(P<0.01),FST和TST不动时间显著减少(P<0.01),SPT蔗糖偏好率显著增加(P<0.01)。p-GSK3β(Ser9)/GSK3β和p-CREB(Ser133)/CREB的比值进一步呈剂量依赖性增加(P<0.05,P<0.01),p-NF-κB/NF-κB比值呈剂量依赖性降低(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA具有显著的抗ApoE^(-/-)小鼠冠心病伴抑郁作用,其机制可能是通过调节GSK3β的表达,继而影响NF-κB与CREB的活化来实现的。

摘要： 目的探讨丹参酮ⅡA对人膀胱癌J82细胞增殖与凋亡效应及作用机制。方法以不同浓度(1、2、3、5、8μmol/L)的丹参酮ⅡA处理J82细胞48 h,先后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测法检测梯度剂量的丹参酮ⅡA对J82细胞半数抑制率(IC50)的测定及细胞增殖的影响,流式细胞术及Annex V/PI染色检测法用于检测丹参酮ⅡA对J82细胞凋亡及细胞周期的影响,免疫印迹法(Western-blotting)检测与细胞;周亡相关的蛋白cyclin Dl、Bel-xL、caspase3、caspase8、caspase9、P65表达的差异。结果丹参酮ⅡA能够抑制人膀耽癌J82细胞的活性,且具有浓度依赖性(P<0.05),半数抑制浓度(IC50)为4.16μmol/L。1、3μmol/L丹参酮ⅡA处理组的G1期细胞百分比分别为(47.98%±1.49%)、(54.94%±3.39%),均高于对照组(42.22%±0.48%)(均P<0.05),且3μmol/L组高于1 pmol/L组(P<0.05);3μmol/L组的S期细胞百分比(33.19%±4.17%)低于对照组(46.32%±2.14%)(P<0.05)。1、3、5μmol/L组的总凋亡率分别为11.23%、14.84%、18.42%,均高于对照组的3.26%(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。1、3 pmol/L组的caspase3蛋白相对表达量分别为(0.39±0.02)、(0.52±0.03),均高于对照组的0.26±0.02(P<0.05);caspase9蛋白相对表达量分别为(0.18±0.03)、(0.33±0.12),均高于对照组的0.02±0.02(P<0.05);3μmol/L组两种蛋白的表达量均高于1μmol/L组(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA在体外可抑制J82细胞增殖,G1/S期阻滞可能是其中的机制之一,同时可能通过线粒体途径诱导J82细胞凋亡。

摘要： 目的研究丹参酮ⅡA(TSⅡA)对心肌梗死(MI)大鼠心脏功能、心肌细胞自噬及Notch通路的调节作用。方法选择成年雄性SD大鼠并分为对照组、MI组、TSⅡA组,后两组采用左冠状动脉前降支结扎的方式建立MI模型,TSⅡA组给予50 mg/kg TSⅡA腹腔注射、连续3周。比较三组大鼠心脏功能超声指标、血清心肌损伤标志物、心肌中凋亡基因及Notch通路基因表达的差异。结果MI组大鼠的LVEF、LVFS水平及心肌中P62、Notch1、Hes1、HIF-1α的表达水平均明显低于对照组,血清中CK、CK-MB、LDH的含量及心肌中LC3-II/LC3-I、Beclin-1、PTEN的表达水平明显高于对照组;TSⅡA组大鼠的LVEF、LVFS水平及心肌中P62、Notch1、Hes1、HIF-1α的表达水平均明显高于MI组,血清中CK、CK-MB、LDH的含量及心肌中LC3-II/LC3-I、Beclin-1、PTEN的表达水平明显低于MI组。结论丹参酮ⅡA对MI大鼠的心脏功能、心肌细胞自噬具有改善作用,且该作用可能与Notch通路的激活有关。

摘要： 目的 探究丹参酮ⅡA治疗野百合碱所致大鼠肺动脉高压(PAH)的作用机制。方法 选取100只SD雄性大鼠,按随机数字表法分为5组(20只/组):模型组(MCT)、丹参酮ⅡA组(TⅡA)、丹参酮ⅡA+PI3K抑制剂组(TP)、PI3K抑制剂组(PI)、对照组。除对照组颈背部注射等体积生理盐水外,剩余大鼠均颈背部注射野百合碱(MCT)诱导肺动脉高压模型。2周后,丹参酮ⅡA组腹腔注射丹参酮ⅡA10 mg/kg进行治疗,丹参酮ⅡA+PI3K抑制剂组注射丹参酮ⅡA10 mg/kg+PI3K抑制剂1 mg/kg,PI3K抑制剂组注射PI3K抑制剂1 mg/kg,对照组和模型组均腹腔注射等体积生理盐水。治疗2周后,采用苏木精-伊红(HE)染色实验和α-SMA免疫荧光染色实验评估大鼠肺血管形态;Western blot实验评估大鼠肺组织中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB/Akt)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的磷酸化水平;ELISA法测定eNOS、NO水平。结果 HE染色实验和α-SMA免疫荧光染色证实丹参酮ⅡA能有效抑制PAH大鼠肺血管中膜厚度和血管肌化水平(P<0.01);Western blot实验结果显示丹参酮ⅡA能够显著提高PAH大鼠肺组织中PI3K、Akt和eNOS蛋白的磷酸化水平;ELISA实验结果显示模型组eNOS、NO水平降低(P<0.01)。结论 丹参酮ⅡA能够通过介导PI3K/Akt-eNOS信号通路改善野百合碱所致大鼠肺动脉高压。

摘要： 采用二维相关光谱(2D-COS)技术,以氘代氯仿为溶剂,解析了丹参酮ⅡA和隐丹参酮标准品的近红外光谱(NIR)。丹参酮ⅡA和隐丹参酮二维相关切片谱在1600~1800,1900~2230和2300~2400 nm处有特征吸收,其中丹参酮ⅡA在1640和2140 nm处有不同于隐丹参酮的呋喃环双键一级倍频和组合频吸收,1696 nm为丹参酮ⅡA和隐丹参酮分子中甲基伸缩振动二级倍频,1726和1740 nm处吸收为丹参酮ⅡA和隐丹参酮环己烯亚甲基伸缩振动二级倍频,2146和2220 nm为丹参酮ⅡA和隐丹参酮苯环C-C伸缩振动与C-H伸缩振动的组合频,2300~2400 nm处一系列峰为丹参酮ⅡA和隐丹参酮甲基伸缩振动与弯曲振动组合频吸收。以丹参酮提取物为载体,以丹参酮ⅡA和隐丹参酮光谱解析特征波段及组合间隔偏最小二乘(SiPLS)筛选特征波段分别建立偏最小二乘(PLS)定量模型,模型的决定系数R^(2)均大于0.9,校正均方根误差(root mean of square error of calibration,RMSEC)和交叉验证均方根误差(RMSECV),预测均方根误差(RMSEP)均较小。结果表明,2D-COS技术解析特征波段与SiPLS波段筛选所建PLS模型均稳定。2D-COS技术使近红外定量模型更具解释性,可解析出结构差异特征吸收,同一波段可实现结构类似物的同时定量测定。

摘要： 目的：探讨丹参酮ⅡA对大肠癌细胞转移能力的影响及可能的作用机制. 方法：利用CCK-8检测不同浓度丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响;采用transwell、划痕实验研究丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞侵袭转移能力的影响;利用Western Blot研究丹参酮ⅡA对EP2介导的β-arrestin/β-catenin信号传递轴的影响. 结果：丹参酮ⅡA能够以剂量和时间依赖性方式抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖;EP2能够促进LoVo细胞的侵袭转移能力(P＜0.01),上调β-arretin的表达,进一步促进β-catenin的核转移(P＜0.01);与空白对照组比较,丹参酮ⅡA能够明显抑制LoVo细胞的侵袭转移能力且呈剂量依赖性(P＜0.01);同时,丹参酮ⅡA能够直接下调EP2受体的表达,抑制β-arretin的激活,进一步抑制β-catenin的核转移(P＜0.01). 结论：丹参酮ⅡA能够抑制EP2/β-arrestin信号通路的激活,从而阻断β-catenin信号通路,发挥抗大肠癌侵袭转移的作用.

摘要： 目的：探讨丹参酮ⅡA对大肠癌细胞转移能力的影响及可能的作用机制. 方法：利用CCK-8检测不同浓度丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响;采用transwell、划痕实验研究丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞侵袭转移能力的影响;利用Western Blot研究丹参酮ⅡA对EP2介导的β-arrestin/β-catenin信号传递轴的影响. 结果：丹参酮ⅡA能够以剂量和时间依赖性方式抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖;EP2能够促进LoVo细胞的侵袭转移能力(P＜0.01),上调β-arretin的表达,进一步促进β-catenin的核转移(P＜0.01);与空白对照组比较,丹参酮ⅡA能够明显抑制LoVo细胞的侵袭转移能力且呈剂量依赖性(P＜0.01);同时,丹参酮ⅡA能够直接下调EP2受体的表达,抑制β-arretin的激活,进一步抑制β-catenin的核转移(P＜0.01). 结论：丹参酮ⅡA能够抑制EP2/β-arrestin信号通路的激活,从而阻断β-catenin信号通路,发挥抗大肠癌侵袭转移的作用.

摘要： 目的：探讨丹参酮ⅡA对大肠癌细胞转移能力的影响及可能的作用机制. 方法：利用CCK-8检测不同浓度丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响;采用transwell、划痕实验研究丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞侵袭转移能力的影响;利用Western Blot研究丹参酮ⅡA对EP2介导的β-arrestin/β-catenin信号传递轴的影响. 结果：丹参酮ⅡA能够以剂量和时间依赖性方式抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖;EP2能够促进LoVo细胞的侵袭转移能力(P＜0.01),上调β-arretin的表达,进一步促进β-catenin的核转移(P＜0.01);与空白对照组比较,丹参酮ⅡA能够明显抑制LoVo细胞的侵袭转移能力且呈剂量依赖性(P＜0.01);同时,丹参酮ⅡA能够直接下调EP2受体的表达,抑制β-arretin的激活,进一步抑制β-catenin的核转移(P＜0.01). 结论：丹参酮ⅡA能够抑制EP2/β-arrestin信号通路的激活,从而阻断β-catenin信号通路,发挥抗大肠癌侵袭转移的作用.

摘要： 目的：探讨丹参酮ⅡA对大肠癌细胞转移能力的影响及可能的作用机制. 方法：利用CCK-8检测不同浓度丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响;采用transwell、划痕实验研究丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞侵袭转移能力的影响;利用Western Blot研究丹参酮ⅡA对EP2介导的β-arrestin/β-catenin信号传递轴的影响. 结果：丹参酮ⅡA能够以剂量和时间依赖性方式抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖;EP2能够促进LoVo细胞的侵袭转移能力(P＜0.01),上调β-arretin的表达,进一步促进β-catenin的核转移(P＜0.01);与空白对照组比较,丹参酮ⅡA能够明显抑制LoVo细胞的侵袭转移能力且呈剂量依赖性(P＜0.01);同时,丹参酮ⅡA能够直接下调EP2受体的表达,抑制β-arretin的激活,进一步抑制β-catenin的核转移(P＜0.01). 结论：丹参酮ⅡA能够抑制EP2/β-arrestin信号通路的激活,从而阻断β-catenin信号通路,发挥抗大肠癌侵袭转移的作用.

摘要： 目的：探讨丹参酮ⅡA对大肠癌细胞转移能力的影响及可能的作用机制. 方法：利用CCK-8检测不同浓度丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞增殖的影响;采用transwell、划痕实验研究丹参酮ⅡA对人结肠癌LoVo细胞侵袭转移能力的影响;利用Western Blot研究丹参酮ⅡA对EP2介导的β-arrestin/β-catenin信号传递轴的影响. 结果：丹参酮ⅡA能够以剂量和时间依赖性方式抑制人结肠癌LoVo细胞的增殖;EP2能够促进LoVo细胞的侵袭转移能力(P＜0.01),上调β-arretin的表达,进一步促进β-catenin的核转移(P＜0.01);与空白对照组比较,丹参酮ⅡA能够明显抑制LoVo细胞的侵袭转移能力且呈剂量依赖性(P＜0.01);同时,丹参酮ⅡA能够直接下调EP2受体的表达,抑制β-arretin的激活,进一步抑制β-catenin的核转移(P＜0.01). 结论：丹参酮ⅡA能够抑制EP2/β-arrestin信号通路的激活,从而阻断β-catenin信号通路,发挥抗大肠癌侵袭转移的作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 本发明公开了一种采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，其过程包括：(1)将水提取后的丹参药渣干燥，粉碎，用乙醇提取浓缩后得到丹参醇提物浸膏；(2)将浸膏分别经石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯部位、浓缩；(3)采用中压制备液相得到总丹参酮粗提物；(4)采用UPLC分析，然后合并丹参酮IIA和二氢丹参酮I部位(5)经高压制备液相分离得到丹参酮IIA和二氢丹参酮I单体化合物。本发明为首次采用中、高压制备液相联用技术，可高效快速地从丹参药渣中制备分离纯化高纯度的丹参酮IIA和二氢丹参酮I化合物，充分利用废弃资源，具有重要的环境保护意义和经济价值。

摘要： 本发明提供一种丹参酮ⅡA微乳制剂、微乳凝胶制剂以及它们的制备方法。丹参酮ⅡA微乳制剂由下述组分组成：丹参酮ⅡA、质量比为7:3的Solutrol HS‑15与吐温80的混合物、无水乙醇、由薰衣草精油、迷迭香精油、葡萄柚精油和茶树精油以质量比为2:2:1:1组成的复方植物精油和水。微乳凝胶制剂由下述组分组成：上述微乳制剂、卡波姆940和三乙醇胺。本发明通过实验筛选出了合适的乳化剂、助乳化剂和油相，并对各组分间的配比进行了优化，得到了圆球形分布，大小均匀、圆整的微乳制剂。本发明以所述微乳制剂为基础，进一步考察了卡波姆940的添加量，得到了累计透过量最优的微乳凝胶制剂的配方。

摘要： 本发明提供一种直接采用丹参酮粗提物制备丹参酮IIA磺酸钠的方法。通过在有机溶剂中用三氧化硫或三氧化硫复合物对丹参酮粗提物直接进行磺化反应，反应结束后将反应液过滤并用有机溶剂进行洗涤，除去丹参酮粗提物中未反应的杂质和其它在有机溶剂中可溶解的杂质，得到的滤饼溶解后用含钠试剂将其转化成丹参酮IIA磺酸钠。本发明没有使用对环境污染严重的浓硫酸、醋酸、醋酸酐等化工试剂，而是采用对环境友好的试剂进行磺化反应。同时本发明直接采用丹参酮粗提物为原料进行反应，降低了采用高纯度丹参酮IIA为原料的成本，且得到产品的副产物少，产品的收率和纯度高。

摘要： 丹参酮ⅡA隐丹参酮 二氢丹参酮 丹参酮Ⅰ通常采用上柱层柝的方法来取得，可提取得到的成品物质比例太低，而且耗费时间和大量原料。本发明通过柱层柝和在上柱期间经过使用醋酸乙酯、硅胶H、苯、氯仿、60－90规格石油醚多次提取的方法可有效提高丹参酮ⅡA 隐丹参酮 二氢丹参酮 丹参酮Ⅰ的提取方法。

摘要： 本发明公开了一种从丹参中制备丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA的方法，具体为获得丹参提取物后用一定量有机试剂溶解做前处理，然后上样进制备液相，在一个程序下可以同时将丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA四种单体成分分离收集。本发明具有操作便利、重现性好、周期短、同时制备4种单体成分等特点，制备的丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮I和丹参酮IIA产品具有纯度高的特点。

摘要： 本发明公开了一种丹参中丹参酮IIA和隐丹参酮提纯的方法，通过将丹参粉在连续逆迴流超声提取器中得到滤液，并将滤渣用相同方法获取滤液，两次滤液合并减压浓缩回收乙醇得总浸膏，将浸膏溶解在用水饱和的乙酸乙酯溶液中、萃取、加5％的NaHCO

摘要： 本发明提供了一种测定组织中扶正化瘀制剂隐丹参酮和/或丹参酮IIA浓度的方法，该方法包括以下步骤：(1)待测组织样本预处理，获取待测液；(2)隐丹参酮和/或丹参酮IIA标准曲线制备；以及(3)液相色谱‑质谱联用检测该待测液中隐丹参酮和/或丹参酮IIA浓度，其中，该液相色谱‑质谱联用的色谱条件为：色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18(RRHD)SB‑C18柱(2.1mm×100mm，1.8μm)，流动相：水相(A)为纯水，有机相(B)为甲醇或乙腈；洗脱方式：采用以下梯度程序洗脱：0‑1min，80％A；1‑6min，80％‑50％A；6‑15min，50％‑5％A；15‑19min，5％A；19.01min，80％A；19.01‑22min，80％A；其中，该液相色谱‑质谱联用的质谱条件为：电喷雾离子源(ESI)，采用正负离子模式检测，质量扫描范围m/z 100‑600。

摘要： 本发明公开了一种包含丹酚酸A、二氢丹参酮I和隐丹参酮的组合物，其中该丹酚酸A、该二氢丹参酮I和该隐丹参酮之间的摩尔比为(1‑4)∶(1‑4)∶(1‑4)。该组合物能够显著降低肝纤维化模型小鼠血清转氨酶水平、减轻肝组织炎症和胶原沉积、抑制促炎型巨噬细胞分泌促炎症细胞因子、抑制促炎型巨噬细胞炎症小体活化，并证实该丹酚酸A、该二氢丹参酮I和该隐丹参酮之间的摩尔比以1∶3∶4和3∶4∶2为最佳。

摘要： 本发明公开了一种采用中、高压制备液相法制备丹参酮IIA和二氢丹参酮I的方法，其过程包括：(1)将水提取后的丹参药渣干燥，粉碎，用乙醇提取浓缩后得到丹参醇提物浸膏；(2)将浸膏分别经石油醚、乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯部位、浓缩；(3)采用中压制备液相得到总丹参酮粗提物；(4)采用UPLC分析，然后合并丹参酮IIA和二氢丹参酮I部位(5)经高压制备液相分离得到丹参酮IIA和二氢丹参酮I单体化合物。本发明为首次采用中、高压制备液相联用技术，可高效快速地从丹参药渣中制备分离纯化高纯度的丹参酮IIA和二氢丹参酮I化合物，充分利用废弃资源，具有重要的环境保护意义和经济价值。

摘要： 本发明公开了一种工艺简单且成本低的丹参酮IIA、丹参酮I提取和纯化方法。其中以丹参根为原料，首先采用醇提法制备出丹参酮混合物，再采用Sephadex？LH20层析进一步分离，使用甲醇/异丙醇混合溶液进行洗脱，收集丹参酮IIA洗脱液和丹参酮I洗脱液，经过浓缩和喷雾干燥工艺后，得到精制的丹参酮IIA和丹参酮I，纯度可达90％以上。本发明的方法最大程度地保留了有效成分的活性，显著提高提取效率，适合大规模生产应用。