A549细胞

摘要： 目的探讨枇杷叶提取物对脂多糖(LPS)诱导的人Ⅱ型肺泡上皮细胞A549增殖、凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法2019年6月至2020年7月,采用LPS诱导的A549细胞建立肺损伤模型(LPS组),同时将正常培养的细胞作为对照组。不同剂量(1 mg/L、2 mg/L、4 mg/L)的枇杷叶提取物处理细胞(LPS+枇杷叶-L组、LPS+枇杷叶-M组、LPS+枇杷叶-H组),添加磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路抑制剂LY294002与枇杷叶提取物处理细胞(LPS+枇杷叶-H+LY294002组);采用MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的含量;采用硫代巴比妥酸法检测丙二醛的含量;蛋白质印迹法(Westernblotting)检测磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白蛋白表达量。结果与对照组比较,LPS组吸光度[(1.38±0.06)比(0.55±0.02)]及SOD的含量[(81.66±5.36)U/L比(14.65±1.06)U/L]降低,凋亡率[(6.41±0.25)%比(27.43±1.00)%]、Bax蛋白水平及LDH[(242.86±6.09)U/L比(875.92±15.01)U/L]、丙二醛[(121.55±3.17)μmol/g比(424.46±6.48)μmol/g]的含量升高,Bcl-2、p-PI3K[(0.60±0.04)比(0.13±0.01)]、p-Akt[(0.51±0.04)比(0.09±0.01)]蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与LPS组比较,LPS+枇杷叶-M组、LPS+枇杷叶-H组吸光度[(0.55±0.02)比(0.86±0.03)、(1.18±0.05)]及SOD[(14.65±1.06)U/L比(36.84±2.08)U/L、(70.97±3.03)U/L]的含量升高,凋亡率[(27.43±1.00)%比(22.24±0.81)%、(14.78±0.49)%]、Bax蛋白水平及LDH[(875.92±15.01)U/L比(641.95±9.81)U/L、(365.47±7.02)U/L]、丙二醛[(424.46±6.48)μmol/g比(277.94±6.90)μmol/g、(156.30±3.26)μmol/g]的含量降低,Bcl-2、p-PI3K[(0.13±0.01)比(0.32±0.01)、(0.54±0.03)]、p-Akt[(0.09±0.01)比(0.25±0.02)、(0.42±0.03)]蛋白水平升高,均差异有统计学意义(P<0.05);添加LY294002可明显逆转枇杷叶提取物对LPS诱导的A549细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论枇杷叶提取物可通过激活PI3K/Akt信号通路减轻LPS诱导的A549细胞增殖抑制、凋亡和氧化应激效应,为探究枇杷叶治疗细菌感染引起的急性肺损伤提供依据。

摘要： 目的探究miR-145调控非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞生物学特性及对雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号转导通路的影响。方法将A549细胞分为miR-145组、对照组、miR-145抗体组和对照抗体组。采用Lipofectamine;2000转染试剂盒进行质粒转染,行MTT、细胞凋亡、细胞迁移、细胞侵袭检测,Western blotting检测分析雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、真核细胞翻译起始因子(eIF4E)、磷酸化eIF4E(p-eIF4E)、核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、磷酸化p70S6K(p-p70S6K)、S6核糖体蛋白(S6)、磷酸化S6(p-S6)、eIF4E结合蛋白1(4E-BP)、磷酸化4E-BP(p-4E-BP)水平。结果对照组和对照抗体组细胞miR-145表达和细胞凋亡水平差异无显著性(P>0.05),但与miR-145组和miR-145抗体组比较有明显差异,其中miR-145组最高,miR-145抗体组最低(P0.05),但与miR-145组和miR-145抗体组比较有明显差异,其中miR-145组最低,miR-145抗体组最高(P<0.05)。结论miR-145可通过mTOR途径调控NSCLC A549细胞生物学特性,促进细胞凋亡,抑制细胞增殖活性、迁移能力及侵袭能力。

摘要： 目的从微小RNA-101(miR-101)/Zeste基因同源蛋白2(EZH2)轴的角度探究槲皮素逆转非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转分化(EMT)及吉西他滨(Gb)耐药性的分子机制。方法用不同浓度槲皮素培养A549及A549/Gb,CCK-8法筛选适宜的槲皮素浓度进行后续试验;取A549细胞分为空白组、A549+EMT诱导剂组、A549+槲皮素组、槲皮素+EMT诱导剂组;A549细胞和A549/Gb分为A549组、A549/Gb组、A549/Gb+槲皮素组、A549/Gb+EMT诱导剂组、miR-101-inhibitor组、槲皮素+miR-101-inhibitor组、miR-NC组;实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组miR-101表达水平;Western blot法检测EZH2、转化生长因子(TGF)-β1、果蝇母亲DPP同源物4(SMAD4)、p-SMAD4和EMT标志蛋白E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达;CCK-8法检测各组细胞光密度(OD)值,并计算半数抑制浓度(IC_(50))及耐药指数(IR)。结果槲皮素对A549及A549/Gb的IC_(50)分别为64、128μmol/L。EMT诱导剂增强A549细胞EMT特性(N-cadherin及Vimentin表达升高,E-cadherin表达降低)后,A549细胞miR-101表达降低,EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达水平,IC_(50)及IR升高(P<0.05);槲皮素可抑制A549细胞EMT特性、降低IC_(50)及IR,并上调miR-101,抑制EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达(P<0.05);EMT诱导剂可逆转槲皮素的上述作用(P<0.05)。与A549细胞相比,A549/Gb细胞的EMT特性增强,IC_(50)、IR、EZH2、TGF-β1、pSMAD4/SMAD4表达均升高(P<0.05);抑制miR-101或EMT诱导剂处理,均可进一步增强A549/Gb细胞的EMT特性,升高IC_(50)、IR,上调EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达(P<0.05);槲皮素可抑制A549/Gb细胞的EMT进程、降低其IC_(50)、IR及EZH2、TGF-β1、p-SMAD4/SMAD4蛋白表达(P<0.05);抑制miR-101表达可逆转槲皮素的上述作用(P<0.05)。结论槲皮素可通过上调miR-101,抑制EZH2表达,进而抑制EMT进程,降低NSCLC细胞耐药性。

摘要： 目的:探讨低浓度人参水提液(LWEG)对肺癌A549细胞癌性包括细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响,以更加全面地了解人参对肺癌A549细胞的影响。方法:将细胞分为对照组、WEG组(1.25,2.5,5,10,20,40,80,160 mg/mL)。通过MTT法检测不同浓度WEG对A549细胞增殖的影响,进而筛选出LWEG的浓度范围,再通过划痕实验与Transwell小室侵袭实验分别检测LWEG(2.5,5,10 mg/mL)对A549细胞迁移、侵袭能力的影响。并运用网络药理学研究策略对其潜在的作用机制进行预测分析。结果:与对照组相比,LWEG组A549细胞增殖显著增加,细胞的迁移和侵袭能力均明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。网络药理学预测分析表明这一作用可能与ErbB信号通路及代谢和应激反应有较大关联。结论:LWEG直接作用于A549细胞,能够提高A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

摘要： 目的探究miR-199-3p过表达靶向抑制SOX5对肺癌A549细胞生长、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响。方法荧光素酶实验检测miR-199a-3p与SOX5靶向关系。构建SOX5 pcDNA载体过表达SOX5,将miR-199-3p与pcDNA-SOX5单独或联合转染A549,将细胞随机分为对照组(Control组)、miR-199-3p过表达组(mimic组)、SOX5组和mimic+SOX5组进行后续实验。克隆形成法检测肺癌A549细胞增殖情况,流式细胞术检测肺癌A549细胞凋亡情况,Transwell检测肺癌A549细胞侵袭能力;荧光显微镜观察肺癌A549细胞EMT形态学变化;蛋白免疫印迹试验检测Ki-67、PCNA、Bax、Bcl-2、Caspase-3、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平。结果与SOX5组比较,mimic+SOX5组细胞克隆形成率降低,Ki-67、PCNA蛋白水平降低,细胞凋亡率升高,Bax/Bcl-2和cleaved Caspase-3/Caspase-3比值升高,细胞侵袭数降低,E-cadherin蛋白水平升高,N-cadherin、Vimentin蛋白水平降低(P<0.05)。结论miR-199-3p靶向SOX5抑制肺癌A549细胞增殖、侵袭和EMT,并诱导细胞凋亡。

摘要： 目的探讨白花檵木粗提物对肺腺癌A549细胞体外增殖的影响。方法CCK-8法检测不同浓度白花檵木粗提物对A549细胞增殖的影响;集落形成实验检测白花檵木粗提物对A549细胞克隆生长能力的影响;流式细胞Annexin V-APC/PI双染法检测白花檵木粗提物诱导A549细胞凋亡的情况;免疫印迹法检测白花檵木粗提物处理后细胞凋亡相关蛋白Bax、Fas、Bcl-2、Caspase3以及活性Caspase3表达的影响。结果白花檵木粗提物可显著抑制A549细胞的生长增殖和集落形成,并呈时间及剂量依赖性,0.5 mg/ml白花檵木粗提物作用48 h后,A549细胞活力下降50%,40μg/ml白花檵木粗提物作用14天后,A549细胞集落形成能力被完全抑制;白花檵木粗提物作用A549细胞24 h后,呈现不同程度的凋亡,凋亡率随浓度的增加而升高;与对照组相比,凋亡抑制因子Bcl-2蛋白表达水平降低,Fas、Bax及活性Caspase3蛋白等凋亡促进因子表达水平升高。结论白花檵木粗提物体外对人肺腺癌细胞生长具有一定的抑制作用,其机制可能与激活线粒体及死亡受体凋亡通路有关。

摘要： 目的:探讨PM_(2.5)混悬液对人肺癌A549细胞、人肝癌HepG2细胞和人肾癌A498细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:采用10、50μg/mL的PM_(2.5)混悬液分别对A549、HepG2和A498细胞染毒24 h,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力。结果:迁移实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_(2.5)染毒组A549细胞穿膜细胞数分别为(356.33±30.92)、(476.33±28.50)和(563.33±74.00)个;HepG2细胞分别为(86.42±4.75)、(140.00±16.15)和(234.17±9.06)个;A498细胞分别为(42.33±6.43)、(80.00±6.08)和(174.67±25.01)个。侵袭实验结果显示,阴性对照组、10和50μg/mL PM_(2.5)染毒组A549细胞的穿膜细胞数分别为(188.33±9.45)、(313.00±7.94)和(404.00±57.66)个;HepG2细胞分别为(48.33±3.26)、(97.75±6.63)和(123.92±8.57)个;A498细胞分别为(5.67±5.03)、(21.33±5.13)和(40.67±6.81)个。在迁移实验和侵袭实验中,与阴性对照组相比,PM_(2.5)染毒组中的3种细胞穿膜细胞数均增加(P<0.05或0.01)。结论:PM_(2.5)可增强A549、HepG2和A498细胞的迁移和侵袭能力。

摘要： 目的探讨二氧化硅对人肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的肺腺癌A549细胞的毒性作用。方法将A549细胞暴露于二氧化硅中24 h,观察二氧化硅对A549细胞内氧化应激指标、炎性细胞因子及非神经元型胆碱能系统关键分子的影响,采用化学比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,使用改良Ellman法测定AChE酶活性,使用Real-time PCR法测定乙酰胆碱受体mRNA表达水平。结果CCK-8检测结果表明,1、2、4、8μg·cm^(-2)的二氧化硅刺激A549细胞24 h后,对细胞存活率均无影响(P均>0.05)。生化检测结果表明,与对照组相比,4、8μg·cm^(-2)二氧化硅暴露组SOD活性下降、IL-6水平升高,8μg·cm^(-2)二氧化硅暴露组TNF-α水平升高(P均<0.05);与对照组相比,8μg·cm^(-2)二氧化硅暴露组AChE酶活性、CHRM5及CHRNA7 mRNA表达水平均降低,CHRNA9 mRNA表达水平升高(P均<0.05)。结论二氧化硅暴露对A549细胞的毒性作用主要表现为氧化-抗氧化失衡、引发炎性反应和改变AChE酶活性及乙酰胆碱受体mRNA的表达水平。

摘要： 目的探讨miRNA-146b-5p靶向调节线皮素-1(LAD-1)对非小细胞肺癌(NSCLC)增殖和凋亡的影响。方法选取我院2018年3月至2021年1月接收的45例诊断为NSCLC并进行肿瘤根治术的患者,留存肿瘤组织及癌旁组织作为检测样本。采用RT-PCR检测样本中miRNA-146b-5p相对表达量。复苏NSCLC A549细胞,并建立稳定A549敲降miRNA-146b-5p细胞及过表达miRNA-146b-5p细胞,依次设定为对照组、敲降组及过表达组。采用CCK-8法、流式细胞术及蛋白印迹法分别测定三组的细胞增殖率、凋亡率及LAD-1蛋白相对表达量。结果肿瘤组织中miRNA-146b-5p相对表达量明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。敲降组的miRNA-146b-5p相对表达量明显低于对照组(P<0.05);过表达组的miRNA-146b-5p相对表达量明显高于对照组(P<0.05)。培养12、24、48、72 h,敲降组的细胞增殖率低于对照组,过表达组的细胞增殖率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。敲降组的细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);过表达组的细胞凋亡率低于对照组(P<0.05)。敲降组的LAD-1蛋白相对表达量明显低于对照组(P<0.05);过表达组的LAD-1蛋白相对表达量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-146b-5p在NSCLC肿瘤组织中呈高表达,其可能通过显著上调LAD-1蛋白表达来促使NSCLC肿瘤细胞增殖并抑制凋亡,进而促进癌症发展。

摘要： 目的:探讨miR-184对顺铂耐药的肺癌细胞PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法:选择人肺腺癌A549和鳞癌SKMES1细胞系分别建立顺铂耐药细胞模型。构建miR-184过表达和低表达质粒载体并成功转染耐药A549和SKMES1细胞,构建过表达和低表达miR-184的耐药细胞。实验分为对照组(未处理的肺癌细胞)、耐药组、过表达组和低表达组,各组细胞培养24、48和72 h后采用MTT法检测细胞增殖率,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,培养72 h后Western blot法检测细胞中PI3K、AKT和mTOR蛋白的表达。结果:耐药组A549和SKMES1细胞中miR-184表达水平高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,耐药组A549和SKMES1细胞增殖率升高;与耐药组比较,过表达组A549和SKMES1细胞增殖率升高,而低表达组降低(P<0.05)。与对照组比较,耐药组A549和SKMES1细胞凋亡率降低;与耐药组比较,过表达组A549和SKMES1细胞凋亡率降低,而低表达组升高(P<0.05)。与对照组比较,耐药组A549和SKMES1细胞PI3K、AKT和mTOR蛋白的表达水平升高;与耐药组比较,过表达组A549和SKMES1细胞PI3K、AKT和mTOR蛋白的表达水平升高,而低表达组降低(P<0.05)。结论:miR-184可能通过激活PI3K/AKT/mTOR细胞信号通路,促进顺铂耐药肺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡。

摘要： 目的：通过观察扶正抗癌(FZKA)方联合吉非替尼(Gefitinib)对非小细胞肺癌细胞H1650、A549增殖的影响,并探讨其作用的分子机制. 方法：用空白对照组、FZKA方组(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2mg·mL-1)、Gefitinib单药组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)、FZKA方(1.6mg·mL-1)联合Gefitinib组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)分别干预细胞后,采用MTT法分别检测对H1650、A549细胞活力的影响,分别计算出半数致死率(IC50);qPCR法检测空白对照组、FZKA方组、Gefitinib单药组及FZKA方联合Gefitinib组对原癌基因c-MET转录水平(mRNA)的影响;Western Blot法分析MET、p-Met(Tyr1234/1235)、PI3K蛋白的表达. 结果：与空白组相比,FZKA方、Gefitinib能显著抑制H1650、A549细胞增殖并呈浓度依赖性;与Gefitinib单药比,FZKA方联合Gefitinib抑制效果优于Gefitinib单药,FZKA方对Gefitinib具有增敏作用;与空白组相比,FZKA方以浓度依赖性下调和MET蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),以时间依赖性下调p-Met(Tyr1234/1235)蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.0);FZKA方联合吉非替尼下调c-MET mRNA和MET、PI3K蛋白表达效果优于FZKA方、Gefitinib单独用药(P＜0.05). 结论：FZKA方对Gefitinib起到增敏的作用,这个作用可能是通过调控MET/PI3K通路来实现.

摘要： 目的：通过观察扶正抗癌(FZKA)方联合吉非替尼(Gefitinib)对非小细胞肺癌细胞H1650、A549增殖的影响,并探讨其作用的分子机制. 方法：用空白对照组、FZKA方组(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2mg·mL-1)、Gefitinib单药组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)、FZKA方(1.6mg·mL-1)联合Gefitinib组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)分别干预细胞后,采用MTT法分别检测对H1650、A549细胞活力的影响,分别计算出半数致死率(IC50);qPCR法检测空白对照组、FZKA方组、Gefitinib单药组及FZKA方联合Gefitinib组对原癌基因c-MET转录水平(mRNA)的影响;Western Blot法分析MET、p-Met(Tyr1234/1235)、PI3K蛋白的表达. 结果：与空白组相比,FZKA方、Gefitinib能显著抑制H1650、A549细胞增殖并呈浓度依赖性;与Gefitinib单药比,FZKA方联合Gefitinib抑制效果优于Gefitinib单药,FZKA方对Gefitinib具有增敏作用;与空白组相比,FZKA方以浓度依赖性下调和MET蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),以时间依赖性下调p-Met(Tyr1234/1235)蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.0);FZKA方联合吉非替尼下调c-MET mRNA和MET、PI3K蛋白表达效果优于FZKA方、Gefitinib单独用药(P＜0.05). 结论：FZKA方对Gefitinib起到增敏的作用,这个作用可能是通过调控MET/PI3K通路来实现.

摘要： 目的：通过观察扶正抗癌(FZKA)方联合吉非替尼(Gefitinib)对非小细胞肺癌细胞H1650、A549增殖的影响,并探讨其作用的分子机制. 方法：用空白对照组、FZKA方组(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2mg·mL-1)、Gefitinib单药组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)、FZKA方(1.6mg·mL-1)联合Gefitinib组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)分别干预细胞后,采用MTT法分别检测对H1650、A549细胞活力的影响,分别计算出半数致死率(IC50);qPCR法检测空白对照组、FZKA方组、Gefitinib单药组及FZKA方联合Gefitinib组对原癌基因c-MET转录水平(mRNA)的影响;Western Blot法分析MET、p-Met(Tyr1234/1235)、PI3K蛋白的表达. 结果：与空白组相比,FZKA方、Gefitinib能显著抑制H1650、A549细胞增殖并呈浓度依赖性;与Gefitinib单药比,FZKA方联合Gefitinib抑制效果优于Gefitinib单药,FZKA方对Gefitinib具有增敏作用;与空白组相比,FZKA方以浓度依赖性下调和MET蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),以时间依赖性下调p-Met(Tyr1234/1235)蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.0);FZKA方联合吉非替尼下调c-MET mRNA和MET、PI3K蛋白表达效果优于FZKA方、Gefitinib单独用药(P＜0.05). 结论：FZKA方对Gefitinib起到增敏的作用,这个作用可能是通过调控MET/PI3K通路来实现.

摘要： 目的：通过观察扶正抗癌(FZKA)方联合吉非替尼(Gefitinib)对非小细胞肺癌细胞H1650、A549增殖的影响,并探讨其作用的分子机制. 方法：用空白对照组、FZKA方组(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2mg·mL-1)、Gefitinib单药组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)、FZKA方(1.6mg·mL-1)联合Gefitinib组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)分别干预细胞后,采用MTT法分别检测对H1650、A549细胞活力的影响,分别计算出半数致死率(IC50);qPCR法检测空白对照组、FZKA方组、Gefitinib单药组及FZKA方联合Gefitinib组对原癌基因c-MET转录水平(mRNA)的影响;Western Blot法分析MET、p-Met(Tyr1234/1235)、PI3K蛋白的表达. 结果：与空白组相比,FZKA方、Gefitinib能显著抑制H1650、A549细胞增殖并呈浓度依赖性;与Gefitinib单药比,FZKA方联合Gefitinib抑制效果优于Gefitinib单药,FZKA方对Gefitinib具有增敏作用;与空白组相比,FZKA方以浓度依赖性下调和MET蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),以时间依赖性下调p-Met(Tyr1234/1235)蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.0);FZKA方联合吉非替尼下调c-MET mRNA和MET、PI3K蛋白表达效果优于FZKA方、Gefitinib单独用药(P＜0.05). 结论：FZKA方对Gefitinib起到增敏的作用,这个作用可能是通过调控MET/PI3K通路来实现.

摘要： 目的：通过观察扶正抗癌(FZKA)方联合吉非替尼(Gefitinib)对非小细胞肺癌细胞H1650、A549增殖的影响,并探讨其作用的分子机制. 方法：用空白对照组、FZKA方组(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2mg·mL-1)、Gefitinib单药组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)、FZKA方(1.6mg·mL-1)联合Gefitinib组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)分别干预细胞后,采用MTT法分别检测对H1650、A549细胞活力的影响,分别计算出半数致死率(IC50);qPCR法检测空白对照组、FZKA方组、Gefitinib单药组及FZKA方联合Gefitinib组对原癌基因c-MET转录水平(mRNA)的影响;Western Blot法分析MET、p-Met(Tyr1234/1235)、PI3K蛋白的表达. 结果：与空白组相比,FZKA方、Gefitinib能显著抑制H1650、A549细胞增殖并呈浓度依赖性;与Gefitinib单药比,FZKA方联合Gefitinib抑制效果优于Gefitinib单药,FZKA方对Gefitinib具有增敏作用;与空白组相比,FZKA方以浓度依赖性下调和MET蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),以时间依赖性下调p-Met(Tyr1234/1235)蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.0);FZKA方联合吉非替尼下调c-MET mRNA和MET、PI3K蛋白表达效果优于FZKA方、Gefitinib单独用药(P＜0.05). 结论：FZKA方对Gefitinib起到增敏的作用,这个作用可能是通过调控MET/PI3K通路来实现.

摘要： 目的：通过观察扶正抗癌(FZKA)方联合吉非替尼(Gefitinib)对非小细胞肺癌细胞H1650、A549增殖的影响,并探讨其作用的分子机制. 方法：用空白对照组、FZKA方组(0.4,0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2mg·mL-1)、Gefitinib单药组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)、FZKA方(1.6mg·mL-1)联合Gefitinib组(2,4,8,10,15,20,25μmol/L)分别干预细胞后,采用MTT法分别检测对H1650、A549细胞活力的影响,分别计算出半数致死率(IC50);qPCR法检测空白对照组、FZKA方组、Gefitinib单药组及FZKA方联合Gefitinib组对原癌基因c-MET转录水平(mRNA)的影响;Western Blot法分析MET、p-Met(Tyr1234/1235)、PI3K蛋白的表达. 结果：与空白组相比,FZKA方、Gefitinib能显著抑制H1650、A549细胞增殖并呈浓度依赖性;与Gefitinib单药比,FZKA方联合Gefitinib抑制效果优于Gefitinib单药,FZKA方对Gefitinib具有增敏作用;与空白组相比,FZKA方以浓度依赖性下调和MET蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.01),以时间依赖性下调p-Met(Tyr1234/1235)蛋白的表达(P＜0.05,P＜0.0);FZKA方联合吉非替尼下调c-MET mRNA和MET、PI3K蛋白表达效果优于FZKA方、Gefitinib单独用药(P＜0.05). 结论：FZKA方对Gefitinib起到增敏的作用,这个作用可能是通过调控MET/PI3K通路来实现.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 目的：研究丹参酮ⅡA(TanshinoneⅡA,T2A)抑制A549肺癌细胞增殖的作用机制,明确T2A诱导的A549细胞自噬与其引起的细胞周期阻滞之间的联系. 方法：CCK8法检测T2A对A549细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测T2A对A549细胞凋亡和细胞周期的影响;Western blot法检测T2A对A549细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9和自噬相关蛋白Beclin-1、p62、LC3B的表达影响;采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理1h,2μM T2A作用24h,Western blot法检测A549细胞p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布. 结果：T2A可明显抑制A549肺癌细胞的增殖,与时间-剂量呈正相关;T2A可导致剂量依赖性的A549细胞阻滞于G0/G1期,T2A可升高Bax/Bcl-2比值,上调cleaved caspase-3、cleaved caspase--9蛋白表达,增加A549细胞凋亡;T2A可提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调Beclin-1表达,降低p62表达,提示T2A可诱导A549细胞自噬;自噬抑制剂3-MA及自噬激动剂雷帕霉素可影响T2A引起的A549细胞周期G0/G1阻滞. 结论：T2A可能通过诱导细胞自噬阻滞A549细胞处于G0/G1期,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤作用.

摘要： 一种促进青梗菜和四九菜心增大增绿的光照培养方法，涉及青梗菜和四九菜心的种植培养。在青梗菜和四九菜心幼苗生长期间，采用人工光源对青梗菜和四九菜心幼苗进行照射，有利于青梗菜和四九菜心幼苗叶片生长，叶片变绿，叶绿素积累。所述人工光源的供光模式为常规白光+低剂量UV‑B光照的供光模式。低剂量UV‑B光的波长为280～320nm，光量子通量密度为3μmol·m‑2·s‑1。适用于全人工光青梗菜和四九菜心幼苗生长。优化光照方法，促进青梗菜和四九菜心幼苗生长，缩短生产周期，减少能耗。方法简单，操作便捷，在农业现代化生产上具有广阔的应用空间与市场前景。

摘要： 一种富贵锑控电位富集并制备四九金的方法，富贵锑破碎磨细至要求粒度后，在纯盐酸体系加入双氧水控电位氧化浸出，浸出后料浆加入铜粉控电位置换，置换渣再用浓硫酸浸煮后得到粗金粉，粗金粉在盐酸溶液中加入双氧水控电位氯化分金，分金液加入氢氧化钠和亚硫酸钠控电位还原得到金粉，金粉经过洗涤后得到四九金粉。本发明的实质是采用控电位方式分别实现了氧化浸出、置换、氯化分金和还原等过程可调可控的目的，金和银的直收率分别达到99.9%和99.0%以上。本发明具有金属分离效果好、技术指标稳定和工艺流程短等优点。

摘要： 一种银阳极泥控电位制备四九金的方法，银阳极泥在硝酸溶液中浸出，硝酸浸出渣再用浓硫酸浸煮后得到粗金粉，粗金粉在盐酸溶液中加入双氧水控电位氯化分金，料浆经过冷却后固液分离，分金液加入氢氧化钠和亚硫酸钠控电位还原得到还原金粉，还原金粉经过浓硫酸精炼后得到四九金粉。本发明的实质是采用控电位方式实现了银阳极泥制备四九金过程的可调可控，制备了纯度为99.99%的金粉，金的直收率达到99.9%以上，具有金直收率高、工艺流程稳定和产品纯度高的优点，克服了传统王水溶解方法存在的环境污染问题。

摘要： 本发明属于有色冶金领域中的贵金属冶炼技术，涉及一种银阳极泥一段化学还原精炼制备四九金的方法。方法为银阳极泥硝酸分银‑分银渣王水分金‑分金液深度除杂‑除杂后液草酸一段还原‑还原金粉加水煮沸‑盐酸浸出。本发明的实质是采用多种手段逐级强化杂质与黄金的分离：银阳极泥硝酸浸出‑浸出渣王水分金‑分金液深度除杂，确保了除杂后液草酸一段还原时，易还原析出的铂、钯，以及易沉淀析出的铜、银、铅和铋等杂质金属混入还原金粉的数量得到了有效控制。继而，还原金粉经过水煮沸洗涤‑盐酸浸出，即可稳定获得国标四九金粉直收率96％‑99％的工艺指标。本发明工艺流程简短，操作简单，能良好适应大规模、小规模的黄金生产过程。

摘要： 一种促进青梗菜和四九菜心增大增绿的光照培养方法，涉及青梗菜和四九菜心的种植培养。在青梗菜和四九菜心幼苗生长期间，采用人工光源对青梗菜和四九菜心幼苗进行照射，有利于青梗菜和四九菜心幼苗叶片生长，叶片变绿，叶绿素积累。所述人工光源的供光模式为常规白光+低剂量UV‑B光照的供光模式。低剂量UV‑B光的波长为280～320nm，光量子通量密度为3μmol·m

摘要： 一种银阳极泥控电位制备四九金的方法，银阳极泥在硝酸溶液中浸出，硝酸浸出渣再用浓硫酸浸煮后得到粗金粉，粗金粉在盐酸溶液中加入双氧水控电位氯化分金，料浆经过冷却后固液分离，分金液加入氢氧化钠和亚硫酸钠控电位还原得到还原金粉，还原金粉经过浓硫酸精炼后得到四九金粉。本发明的实质是采用控电位方式实现了银阳极泥制备四九金过程的可调可控，制备了纯度为99.99%的金粉，金的直收率达到99.9%以上，具有金直收率高、工艺流程稳定和产品纯度高的优点，克服了传统王水溶解方法存在的环境污染问题。

摘要： 一种富贵锑控电位富集并制备四九金的方法，富贵锑破碎磨细至要求粒度后，在纯盐酸体系加入双氧水控电位氧化浸出，浸出后料浆加入铜粉控电位置换，置换渣再用浓硫酸浸煮后得到粗金粉，粗金粉在盐酸溶液中加入双氧水控电位氯化分金，分金液加入氢氧化钠和亚硫酸钠控电位还原得到金粉，金粉经过洗涤后得到四九金粉。本发明的实质是采用控电位方式分别实现了氧化浸出、置换、氯化分金和还原等过程可调可控的目的，金和银的直收率分别达到99.9%和99.0%以上。本发明具有金属分离效果好、技术指标稳定和工艺流程短等优点。

摘要： 本发明的目的在于，提供能够使T细胞或NK细胞高效地增殖并且维持该细胞的状态(例如未分化性)的T细胞或NK细胞的制造方法、T细胞或NK细胞的培养用培养基、T细胞或NK细胞的培养方法、维持未分化T细胞的未分化状态的方法和T细胞或NK细胞的增殖促进剂。本发明涉及T细胞或NK细胞的制造方法等，其包括如下步骤：在含有式(X‑1)或式(X‑2)所示的双苄基异喹啉生物碱或者其中的1个醚键断裂后的化合物或其药学上可接受的盐的培养基中培养T细胞或NK细胞。

摘要： 提供能保存细胞的组合物。本发明的组合物包含微小气泡。

摘要： 本发明涉及一种红细胞除去装置(100)，具备：血液容器(10)，其容纳血液；以及红细胞除去器(11)，其从血液容器(10)接受血液，并从血液至少部分地除去红细胞。