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苦参碱对心肌成纤维细胞增殖、胶原代谢及转化生长因子-β1蛋白表达的影响

         

摘要

目的 探讨苦参碱对醛固酮诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞增殖、胶原代谢的影响,并探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)信号转导通路在苦参碱抗心肌纤维化中的作用机制.方法 体外差速贴壁法分离纯化培养心肌成纤维细胞,试验分为对照组、醛固酮(1.0×10-7mol/L)组和醛固酮+不同浓度(0.125,0.25,0.5 mmol/L)苦参碱组5组.作用24 h后,倒置显微镜观察细胞生长状态;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测心肌成纤维细胞增殖;流式细胞分析仪分析细胞周期;分光光度法检测细胞上清羟脯氨酸含量;细胞免疫荧光染色及流式细胞仪检测TGF-β1.蛋白表达.结果 与对照组比较,醛固酮可显著提高心肌成纤维细胞MTT-OD值,使S期细胞比率增加,Go/G1期细胞比率下降;羟脯氨酸含量、TGF-β1的蛋白表达均显著高于对照组(P<0.01).苦参碱干预24 h后,MTT-OD值、S期的细胞百分比、羟脯氨酸含量、TGF-β1,的蛋白表达均显著低于醛固酮组(P<0.01),且菩参碱的效应呈浓度依赖性.结论 苦参碱可抑制醛固酮诱导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成,其抗纤维化作用可能与直接下调TGF-β1蛋白表达有关.

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