野生番茄LA2157中热稳定抗根结线虫基因Mi-9候选基因的分离与过表达载体构建

王银磊; 陈伟男; 赵丽萍; 周蓉; 宋刘霞; 余文贵; 赵统敏

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Root-knot nematode disease is one of the important tomato soil-borne diseases.Breeding varieties with root-knot nematode resistance is an effective control method to deal with this disease.But at present,Mi-1 the only gene transferred to tomato culture with resistance to root-knot nematode loses its resistance when the soil temperature is over 28 ℃.In this study,wild tomato accession LA2157 with heat-stable resistance to root-knot nematode was used.According to the sequence information of Mi-1,we carried out homologous cloning on Mi-9 gene with heat-stable resistance to root-knot nematode and gained 2 candidate gene segments from LA2157.The candidate gene was ligated with the overexpression vector pBI121 by In-Fusion cloning technique.Electrophoresis and sequencing analysis proved that the recombinant vectors of the candidate gene were constructed.%根结线虫是番茄上的重要土传病害,选育抗根结线虫品种是最有效的防治方法,但是目前转育到栽培番茄中的抗根结线虫基因Mi-1在土温高于28℃时就丧失了抗性.本试验利用热稳定抗根结线虫野生番茄材料LA2157,根据Mi-1基因的序列信息,对其中热稳定抗根结线虫Mi-9基因进行同源克隆,在LA2157中共获得2个候选基因片段;通过In-Fusion克隆技术,将候选基因与过表达载体pBI121进行连接,经电泳检测和测序分析,最终构建Mi-9候选基因的过表达重组载体.

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来源
《中国蔬菜》 |2017年第12期|30-34|共5页
作者
王银磊; 陈伟男; 赵丽萍; 周蓉; 宋刘霞; 余文贵; 赵统敏;
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作者单位

江苏省农业科学院蔬菜研究所;

江苏南京210014;

江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;

江苏南京210014;

扬州大学园艺与植物保护学院;

江苏扬州225009;

江苏省农业科学院蔬菜研究所;

江苏南京210014;

江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;

江苏南京210014;

江苏省农业科学院蔬菜研究所;

江苏南京210014;

江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;

江苏南京210014;

江苏省农业科学院蔬菜研究所;

江苏南京210014;

江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;

江苏南京210014;

江苏省农业科学院蔬菜研究所;

江苏南京210014;

江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;

江苏南京210014;

江苏省农业科学院蔬菜研究所;

江苏南京210014;

江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;

江苏南京210014;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
番茄; 根结线虫; Mi-9基因; 同源克隆; 过表达载体构建;

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