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利用PCR技术同时检测番茄抗根结线虫基因(Mi-1)和抗叶霉病基因(Cf-9)

         

摘要

利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗根结线虫的Mi-1基因和抗番茄叶霉病的Cf-9基因紧密连锁的CAPS(cleaved amplified polymorphic sequences)标记进行同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段吻合.与Cf-9基因紧密连锁的CAPS1标记在抗病试材中可扩增出2775bp的特异片段,且存在TaqⅠ酶切位点,酶切后产生1177bp、446bp、370bp和160bp的不同特异片段;与Mi-1基因紧密连锁的CAPS2为共显性标记,抗性材料中产生915bp的特异片段,TaqⅠ酶切后产生719bp和196bp的特异片段.该体系可用于在同一PCR反应体系中对Mi-1和Cf-92个抗病基因进行同时筛选鉴定.该体系的建立不仅省时、省工,节省费用,而且可用于苗期早期辅助选育,加快番茄育种进程.

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