山东寿光地区番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

乔宁; 李美芹; 郭宝太; 刘永光; 裴华丽; 竺晓平

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山东寿光地区番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

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利用双生病毒简并引物PA/PB,对山东寿光地区保护地疑似感染番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)的番茄植株进行PCR检测,结果证明番茄病叶由TYLCV侵染所致。以提取的病叶总DNA为模板,扩增得到长约770bp的TYLCV-CP基因片段,克隆至pEASY-T1Simple载体,然后用XhoI和EcoRI将其切下并插入到pET-32a表达载体中,构建了寿光地区TYLCV分离物的外壳蛋白基因原核表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG(异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷)诱导获得了50kD重组蛋白,Ni2+-NTA亲和层析纯化和Western印迹分析证明目的蛋白为TYLCV外壳蛋白,且具有良好的抗原活性。

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来源
《中国蔬菜》 |2012年第3x期|35-40|共6页
作者
乔宁; 李美芹; 郭宝太; 刘永光; 裴华丽; 竺晓平;
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作者单位

潍坊科技学院蔬菜花卉研究所;

青岛农业大学生命科学学院;

山东农业大学植物保护学院;

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正文语种 chi
中图分类 S436.412.11;
关键词
番茄黄化曲叶病毒; 外壳蛋白基因; 基因克隆; 原核表达;

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