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煅烧骨与诱导的MSCs复合的实验研究

         

摘要

目的:观察大鼠骨髓基质干细胞(MSCs)与经胶原涂层处理的煅烧骨(CCB)复合行体外培养时贴附、增殖能力的变化,探讨构建组织工程骨体外培养的最适时间.方法:制备鼠尾胶原(Ⅰ型胶原),无菌条件下,将煅烧骨置于胶原液中,2h后取出骨块,置滤网中将孔内外的胶原溶液沥干.体外培养的大鼠MSCs经矿化液诱导向成骨细胞分化.将分化后的成骨细胞滴加到涂胶原的煅烧骨块上,同时以未涂胶原的煅烧骨块为对照组.3夭,7天时取材,扫描电镜下观察实验组与对照组成骨细胞在煅烧骨表面的贴附数量及形态,用细胞计数法测定细胞在两组材料的生长曲线,组织化学方法检测成骨细胞的ALP活性.结果:扫描电镜发现实验组成骨细胞的贴附数量显著高于对照组(P<0.01).细胞计数认为实验组细胞在材料上粘附数量多,增殖速度快.实验组ALP活性明显高于对照组(P<0.01).结论:胶原修饰的煅烧骨具有良好的组织相容性,能明显提高成骨细胞的贴附,并且促进成骨细胞活性维持,体外培养7~8天时,材料上的细胞数达到最大,应尽快植入体内.

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