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大鼠pEGFP-N1-PLZF真核表达载体的构建和意义

         

摘要

目的 构建真核表达载体pEGFP-N1-PLZF,为基因水平研究早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)在精原干细胞增殖和分化中的调控机制提供理论参考.方法 参考分子克隆技术,采用RT-PCR的方法从大鼠睾丸组织中扩增PLZF,将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,以构建重组质粒pEGFP-N1-PLZF.结果 实验从大鼠睾丸组织中提取总RNA,以RT-PCR方法获取编码PLZF基因的全序列cDNA.构建PLZF的c DNA真核表达质粒时将能发出绿色荧光的EGFP报告基因融合在PLZF基因,并经酶切后DNA电泳鉴定及DNA测序证实结果.结论 构建重组质粒pEGFP-N1-PLZF成功,实验中将能发出绿色荧光的EGFP报告基因融合在PLZF基因的3'端.提高PLZF在真核细胞中的表达,而且不影响其目的 蛋白的结构和功能,对研究PLZF调控精原干细胞增殖和分化机制具有重要的意义.

著录项

  • 来源
    《中国男科学杂志》 |2007年第8期|6-8,13|共4页
  • 作者单位

    华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科,武汉,430022;

    华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科,武汉,430022;

    华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科,武汉,430022;

    华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科,武汉,430022;

    华中科技大学同济医学院协和医院骨科,武汉,430022;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 E321.1;
  • 关键词

    PLZF; 基因表达; 绿色荧光蛋白;

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