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TLR4-siRNA对高氧诱导人肺腺癌细胞株A549炎性因子分泌的影响

         
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目的评价Toll样受体4（TLR4）-小干扰RNA（siRNA）对高氧诱导人肺腺癌细胞株A549炎性因子分泌的影响。方法人肺腺癌细胞株A549接种于培养板,培养24 h后,采用随机数字表法,将其随机分为4组:对照组（C组）、高氧组（H组）、TLR4-siRNA转染组（TR组）和阴性siRNA转染组（NR组）。TR组和NR组分别将TLR4-siRNA或阴性siRNA转染至细胞内。H组、TR组和NR组细胞置于独立培养小室中,通入95%O2-5%CO2的混合气体1 L/min 30 min制备高氧模型。采用RTPCR法检测TLR4 mRNA表达,采用流式细胞仪检测TLR4蛋白表达,采用Western bolt法检测NF-κB活性,采用ELISA法检测IL-6和IL-8的浓度。结果与C组比较,H组和NR组TLR4 mRNA及其蛋白表达上调,NF-κB活性、IL-8和IL-6的浓度升高（P＜0.01）,TR组TLR4 mRNA及其蛋白表达、NF-κB活性和IL-8、IL-6的浓度差异无统计学意义（P＞0.05）;与H组比较,TR组TLR4 mRNA及其蛋白表达下调,NF-κB活性、IL-8和IL-6的浓度降低（P＜0.01）,NR组TLR4 mRNA及其蛋白表达、NF-κB活性和IL-8、IL-6的浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 TLR4-siRNA可显著地抑制高氧诱导入肺腺癌细胞株A549炎性因子的分泌。目的评价Toll样受体4（TLR4）-小干扰RNA（siRNA）对高氧诱导人肺腺癌细胞株A549炎性因子分泌的影响。方法人肺腺癌细胞株A549接种于培养板,培养24 h后,采用随机数字表法,将其随机分为4组:对照组（C组）、高氧组（H组）、TLR4-siRNA转染组（TR组）和阴性siRNA转染组（NR组）。TR组和NR组分别将TLR4-siRNA或阴性siRNA转染至细胞内。H组、TR组和NR组细胞置于独立培养小室中,通入95%O2-5%CO2的混合气体1 L/min 30 min制备高氧模型。采用RTPCR法检测TLR4 mRNA表达,采用流式细胞仪检测rLR4蛋白表达,采用Western bolt法检测NF-κB活性,采用ELISA法检测IL-6和IL-8的浓度。结果与C组比较,H组和NR组TLR4 mRNA及其蛋白表达上调,NF-κB活性、IL-8和IL-6的浓度升高（P＜0.01）,TR组TLR4 mRNA及其蛋白表达、NF-κB活性和IL-8、IL-6的浓度差异无统计学意义（P＞0.05）;与H组比较,TR组TLR4 mRNA及其蛋白表达下调,NF-κB活性、IL-8和IL-6的浓度降低（P＜0.01）,NR组TLR4 mRNA及其蛋白表达、NF-κB活性和IL-8、IL-6的浓度差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 TLR4-siRNA可显著地抑制高氧诱导入肺腺癌细胞株A549炎性因子的分泌。

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