血小板在脂多糖激活中性粒细胞致小鼠肺微血管内皮细胞损伤中的作用

孙振朕; 王嘉锋; 龚德军; 卞金俊; 朱科明; 邓小明

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目的评价血小板在脂多糖（LPS）激活中性粒细胞致小鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）损伤中的作用。方法 C3H/HeN小鼠,6～8周龄,雌雄不拘,体重18～25 g,原代培养PMVEC,采用二次离心法分离血小板,采用密度梯度离心法分离中性粒细胞。取2-5代的PMVEC,以10~5个/ml密度接种于12孔（1 ml/孔）或6孔（2 ml/孔）培养板,采用随机数字表法,将其随机分为4组（n=31）:LPS组、血小板组（P组）、中性粒细胞组（N组）和血小板+中性粒细胞组（PN组）。4组均加入终浓度为1μg/ml的LPS,P组和N组分别加入血小板和中性粒细胞,PN组加入血小板和中性粒细胞,血小板和中性粒细胞的终浓度分别为5×10~7个/ml和5×10~5个/ml.分别于孵育1、6、12、18和24 h时每组取1孔,相差显微镜下观察内皮细胞形态和活化情况;于孵育24 h时每组取1孔,荧光显微镜下观察细胞存活情况;分别于孵育1、6、12、18和24 h时取6孔,采用流式细胞术测定内皮细胞存活率、凋亡率及活化率。结果与LPS组比较,N组和P组内皮细胞形态、数量均无明显改变,而PN组活化的内皮细胞增加,活细胞数量减少;与LPS组比较,PN组LPS孵育6～24 h时细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,LPS孵育1～24 h时细胞活化率升高,P组和N组LPS孵育6、12 h时细胞活化率升高（P＜0.05）,其余指标差异均无统计学意义（P＞0.05）;与N组或P组比较,PN组LPS孵育6～24 h时细胞存活率降低,细胞凋亡率和细胞活化率升高（P＜0.05）。结论血小板在LPS激活中性粒细胞致小鼠PMVEC损伤中起决定性作用。

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来源
《中华麻醉学杂志》 |2011年第11期||共页
作者
孙振朕; 王嘉锋; 龚德军; 卞金俊; 朱科明; 邓小明;
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作者单位

1. 第二军医大学长海医院麻醉科 2. 解放军第四零一医院崂山分院麻醉科 3. 第二军医大学长海医院心胸外科;

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正文语种 chi
中图分类病理生理学;
关键词
血小板; 中性白细胞; 脂多糖类; 肺; 毛细血管; 内皮; 血管;

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