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从江香猪FoxO4基因真核表达载体的构建及其在皮下脂肪前体细胞中的表达

         
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摘要

本研究旨在克隆从江香猪FoxO 4基因编码区序列,对FoxO 4基因功能进行初步探究.采用qRT-PCR技术对从江香猪(6月龄)不同组织中FoxO 4基因的相对表达量进行检测;PCR扩增FoxO 4基因CDS区,构建真核表达载体pEGFP-N3-FoxO4;利用脂质体法将重组质粒pEGFP-N3-FoxO4瞬时转染从江香猪皮下脂肪前体细胞,通过qRT-PCR方法,检测FoxO 4、PPARγ、LPL、FAS、ACC、ATGL、HSL的表达水平.结果显示:FoxO 4基因在从江香猪脂肪组织中表达量最高;构建的重组真核表达载体pEGFP-N3-FoxO4在从江香猪皮下脂肪前体细胞中成功表达,与对照组相比,LPL、FAS、ACC、ATGL、HSL基因的表达均显著上调.综上表明,FoxO 4对脂质代谢具有一定的调控作用,可能是影响从江香猪猪肉品质的重要候选基因,为进一步了解从江香猪脂肪沉积机制提供理论基础.%The aim of this study was to clone the coding sequence of FoxO 4 gene of Congjiang Xiang pig and preliminarily explore the function of FoxO 4 gene.The relative expression level of FoxO 4 gene was detected by qRT-PCR in different tissues of Congjiang Xiang pig at the age of 6 month.The recombinant plasmid pEGFP-N3-FoxO4 was constructed by inserting the FoxO 4 gene coding sequence into pEGFP-N3,and then transiently transfected into the subcutaneous preadipocytes of Congjiang Xiang pig by liposome-mediated transfection.The expression levels of FoxO 4,PPARγ,LPL,FAS,ACC,ATGL,HSL in transfected cells were detected by qRT-PCR.The results showed that FoxO 4 gene had the highest expression level in adipose tissue.The constructed plasmid pEGFP-N3-FoxO4 was successfully expressed in subcutaneous preadipocytes.The expression level of LPL,FAS,ACC,ATGL and HSL genes were significantly upregulated in the subcutaneous preadipocytes when compared to the control group.These results revealed that FoxO 4 gene had certain regulation on fat deposition and might be a key candidate gene for the pork quality,which will provide theoretical basis for further studying the mechanism of fat deposition.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2017年第12期|2268-2276|共9页
  • 作者

    孙成娟; 许厚强; 段志强; 陈伟; 赵佳福; 周迪;

  • 作者单位

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院,贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵阳550025;

    贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院,贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵阳550025;

    贵州大学动物科学学院,贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵阳550025;

    贵州大学生命科学学院,贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵阳550025;

    贵州大学生命科学学院,贵阳550025;

    贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵阳550025;

    贵州大学生命科学学院,贵阳550025;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S828.2;
  • 关键词

    FoxO 4基因; 真核表达载体; 皮下脂肪前体细胞; 从江香猪;

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