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山东五大地方鸡禽白血病病毒主要流行亚型鉴定及其分离株gp85基因的分子特征分析

         
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通过对山东五大地方鸡(寿光鸡、芦花鸡、百日鸡、琅琊鸡、鲁西斗鸡)不同亚型禽白血病病毒(ALV)分离株鉴定及gp85基因序列分析,探究山东五大地方鸡ALV的主要流行亚型及gp85基因分子特征.分别将寿光鸡、百日鸡、芦花鸡的无菌抗凝血和琅琊鸡、鲁西斗鸡的卵白接种CEF培养9～10 d,常规方法提取感染细胞的cDNA,用针对J亚型ALV(ALV-J)gp85基因(924 bp)的引物和A～J(含囊膜蛋白env基因,2 400 bp)的群引物进行PCR扩增、克隆、测序并分析其特点.本研究发现,2009 2011年间,山东五大地方鸡均存在ALV-J感染,5个ALV-J分离株gp85基因之间的相似性为98.4％～99.9％,与原型毒株HPRS-103相似性为97.8％～98.3％;均扩出内源性ALV(ALV-E)片段,与不能产生传染性病毒粒子的ev-1、ev-3、ev 6毒株相似性最高,推测为鸡基因组所携带;同时还发现,琅琊鸡、芦花鸡存在A亚型ALV(ALV-A)的感染.研究结果表明,2009-2011年间的山东五大地方鸡已经普遍存在ALV-J,两大品系中存在ALV A和ALV-J共感染,同时ALV-E的片段广泛存在,这一结论揭示出山东地方鸡的禽白血病净化工作更加具有挑战性.

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