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精子蛋白32的表达及酪氨酸磷酸化调控猪精子顶体蛋白的活化

         

摘要

为了探究猪精子蛋白32(Sperm protein,sp32)表达及酪氨酸磷酸化调控猪精子顶体蛋白活化的关系,本研究对不同处理(鲜精、冷冻-解冻、获能、顶体反应)的猪精子顶体膜蛋白进行分离,通过考马斯亮蓝染色、SDS-PAGE电泳和Western blot检测和分析.结果表明,猪精子经过获能处理、冷冻-解冻处理以及顶体反应处理后,前顶体蛋白(Proacrosin)和顶体蛋白(Acrosin)在转化过程中,sp32表达有所差异,获能和顶体反应处理的sp32的表达量略高于冷冻-解冻处理组,而显著高于鲜精处理组.与其他处理组相比,冷冻-解冻精子处理组sp32酪氨酸磷酸化水平产生显著的差异.但在SDS-PAGE电泳中,猪鲜精处理组在蛋白质分子质量38~170 ku区间的蛋白表达条带较其他对比组明显,这表明猪精子在受精前所必需经历的获能和顶体反应过程中,顶体膜蛋白伴随着大分子的蛋白质修饰和降解.结论:sp32作为一种前顶体蛋白结合蛋白,在前顶体蛋白活化过程中它的表达水平及酪氨酸磷酸化水平上调.

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