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柔嫩艾美耳球虫甘肃株钙调域蛋白激酶基因的克隆与表达

         

摘要

应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从柔嫩艾美耳球虫甘肃株(E.tenella GS,Et GS)孢子化卵囊的子孢子中提取总RNA扩增得到鸡球虫子孢子表面抗原钙调域蛋白激酶(CDPK)基因.将Et GS CDPK基因与原核表达载体pGEX-6P1连接,构建了pGEX-CDPK原核表达质粒,并获得高效表达和纯化的CDPK融合蛋白,表达率达35.4%.序列分析表明:Et GS CDPK与文献报道的Et CDPK比较,共有5个核苷酸发生变异,核苷酸同源性为99.6%; 有5个氨基酸发生变异,氨基酸同源性为98%.

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