首页> 中文期刊> 《畜牧兽医学报》 >稳定表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的CHO-K1细胞系的建立及免疫原性分析

稳定表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的CHO-K1细胞系的建立及免疫原性分析

         

摘要

建立高表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,鉴定蛋白的免疫原性,为开发新型且有效防治猪圆环病毒的亚单位疫苗奠定基础.构建重组质粒pEEl2.4 PCV2 Cap,转染CHO-K1细胞,通过加压筛选,有限稀释,细胞悬浮驯化及Western blot检测得到高表达Cap蛋白的悬浮稳转单克隆细胞株,并对该细胞株进行发酵,纯化得到的目的蛋白,通过小鼠免疫验证其免疫原性.结果表明PCV2-Cap蛋白能够在CHO-K1细胞中正确表达;发酵过程中活细胞密度高达6×106个·mL-1,细胞活力在80%以上,PCV2-Cap蛋白表达量约为370 mg·L-1;利用间接ELISA检测小鼠免疫后血清中的抗体水平,证明了利用CHO-K1细胞生产的Cap蛋白具备良好的免疫原性.本研究成功构建了表达PCV2-Cap蛋白的CHO-K1悬浮稳转细胞系,并进一步对目的蛋白进行免疫原性分析,为猪圆环病毒亚单位疫苗的开发打下扎实的基础.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2019年第5期|1056-1063|共8页
  • 作者单位

    新乡学院生命科学与技术学院生物技术研究中心;

    新乡453003;

    郑州大学;

    郑州450000;

    浙江海隆生物技术有限公司;

    绍兴312000;

    浙江海隆生物技术有限公司;

    绍兴312000;

    浙江海隆生物技术有限公司;

    绍兴312000;

    浙江海隆生物技术有限公司;

    绍兴312000;

    新乡学院生命科学与技术学院生物技术研究中心;

    新乡453003;

    浙江海隆生物技术有限公司;

    绍兴312000;

    新乡学院生命科学与技术学院生物技术研究中心;

    新乡453003;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S852.659.2;
  • 关键词

    CHO-K1; PCV2-Cap; 稳转细胞系; 免疫原性;

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号