玉米赤霉烯酮致PC12细胞自噬流阻滞的相关作用机制

曹倩颖; 郑豪; 王娅玲; 邹辉; 顾建红; 袁燕; 刘学忠; 刘宗平; 卞建春

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旨在研究玉米赤霉烯酮(ZEA)对PC12细胞自噬流阻滞的作用机制,以PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤系)为研究材料,以不同浓度的ZEA处理24 h,CCK-8检测细胞存活率,并筛选ZEA最适浓度,分别设置Con组、15μmol·L^(-1) ZEA组、30μmol·L^(-1) ZEA组,Western blot检测自噬相关蛋白ATG5、LC3Ⅱ、p62、Beclin1,溶酶体相关膜蛋白LAMP1,组织蛋白酶B(CTSB)和组织蛋白酶D(CTSD),细胞质及细胞核内TFEB蛋白以及自噬体溶酶体融合相关蛋白STX17和SNAP29的蛋白表达水平;免疫荧光技术检测LC3荧光聚点,TFEB入核情况;mRFP-GFP-LC3检测自噬流情况;AO染色观察细胞内酸性环境变化情况。结果显示,与对照组相比,ZEA处理组中自噬相关蛋白ATG5、LC3Ⅱ、p62、Beclin1蛋白表达水平均显著上升(P<0.05);免疫荧光检测显示LC3荧光聚点逐渐增加;mRFP-GFP-LC3检测表明自噬流阻滞;ZEA处理组中的细胞质蛋白CTSD及CTSB表达水平均显著升高(P<0.05),LAMP1表达水平在ZEA为30μmol·L^(-1)时显著下降(P<0.05);AO染色表明,ZEA可致PC12细胞酸性环境改变,导致溶酶体损伤;p-ERK及核内TFEB蛋白表达水平显著下降(P<0.05),而细胞质内TFEB蛋白表达水平未见显著性变化;SNAP29、STX17蛋白表达水平均显著下降(P<0.05)。综上表明,ZEA可引起PC12细胞自噬水平升高,自噬体增多,并伴随自噬流阻滞,其作用机制与ZEA致溶酶体损伤,抑制TFEB入核,降低自噬体与溶酶体融合相关蛋白表达有关。

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来源
《畜牧兽医学报》 |2022年第4期|1270-1279|共10页
作者
曹倩颖; 郑豪; 王娅玲; 邹辉; 顾建红; 袁燕; 刘学忠; 刘宗平; 卞建春;
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作者单位

扬州大学兽医学院;

江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;

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正文语种 chi
中图分类毒性;
关键词
玉米赤霉烯酮; PC12细胞; 自噬流; 自噬流阻滞;

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