干扰HNRNPAB对牛骨骼肌卫星细胞增殖与分化的作用研究

杨光; 杨旭; 訾晶晶; 于建杰; 郭宏; 丁向彬; 刘新峰; 张林林

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干扰HNRNPAB对牛骨骼肌卫星细胞增殖与分化的作用研究

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为了研究核不均一核糖核蛋白AB(heterogeneous nuclear ribonucleoprotein AB,HNRNPAB)对牛骨骼肌卫星细胞增殖与分化的影响。本研究以体外分离培养的鲁西黄牛胎牛原代骨骼肌卫星细胞为试验材料,体外诱导成肌分化,分别收取分化前和分化后第1、2、3天的细胞,提取RNA(每组设置4个重复)或蛋白质(每组设置3个重复),通过qRT-PCR、Western blot检测HNRNPAB在成肌分化前后的表达情况。随后合成HNRNPAB的干扰RNA,并转染牛骨骼肌卫星细胞干扰HNRNPAB的表达,设置阴性对照组;在试验组和对照组中,分别利用EdU试验检测细胞增殖情况,qRT-PCR技术、Western blot技术检测HNRNPAB、增殖标志因子Pax7、Cyclin D1及分化标志因子MyoG、MyHC的mRNA表达水平及蛋白表达水平。结果显示,HNRNPAB在牛骨骼肌卫星细胞成肌分化过程中的mRNA表达呈现先升后降的趋势,在分化第1天表达量最高,分化前后蛋白表达水平也具有显著差异。干扰HNRNPAB后,EdU细胞阳性率极显著上升(P<0.01),增殖标志因子Pax7、Cyclin D1的mRNA水平与对照组相比极显著下降(P<0.01),Pax7蛋白表达水平极显著上升(P<0.01);与对照组相比,分化标志因子MyoG、MyHC的mRNA表达水平极显著升高(P<0.01),蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。本研究结果表明,干扰HNRNPAB后降低了牛骨骼肌卫星细胞增殖标志因子的转录水平,提高了Pax7的蛋白表达水平,并促进牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。

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来源
《畜牧兽医学报》 |2022年第10期|3412-3420|共9页
作者
杨光; 杨旭; 訾晶晶; 于建杰; 郭宏; 丁向彬; 刘新峰; 张林林;
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作者单位

天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室;

宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类 S823.81;
关键词
HNRNPAB; 牛骨骼肌; 细胞增殖; 成肌分化;

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