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肺炎克雷伯菌产KPC酶合并膜孔蛋白OmpK36缺失对头孢他啶/阿维巴坦耐药的分子机制研究

         

摘要

目的研究产KPC酶肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,Kp)对头孢他啶/阿维巴坦耐药的分子机制。方法临床分离2株对头孢他啶/阿维巴坦耐药的产KPC酶Kp C9和C14,利用胶体金法进行碳青霉烯酶型检测,基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行同源性分析,MIC法进行药物最低抑菌浓度检测,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及基因测序检测外膜蛋白表达及基因突变,羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)抑制试验检测主动外排机制。结果产KPC酶Kp C9和C14同其他产KPC酶Kp同源性较低,对头孢他啶/阿维巴坦的MIC分别为16和32μg/mL,外膜蛋白SDS-PAGE显示Kp C9和C14均有OmpK36的缺失,外膜蛋白基因序列分析显示Kp C9和C14的OmpK36基因序列均存在个别位点的突变、缺失,CCCP抑制试验显示CCCP不能提高Kp C9和C14对头孢他啶/阿维巴坦的敏感性。结论KPC酶合并膜孔蛋白OmpK36缺失可引起Kp对头孢他啶/阿维巴坦耐药。

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