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结核病临床分离株及痰标本中embB基因型的快速测定

         

摘要

目的建立快速测定结核病耐乙胺丁醇(EMB)分离株和痰标本中结核分枝杆菌EMB耐药基因型的方法,以期为患者提供及时、有效地化验结果.方法应用16S rDNA聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)对11株耐EMB分离株和46例结核病痰标本进行分子菌种鉴定和embB基因突变的部位与性质分析.结果以结核分枝杆菌H37Rv标准株为对照,11株耐EMB分离株和46例临床痰标本经16S rDNA PCR-SSCP分析电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同;限制性内切酶NlaⅢ消化embB基因扩增产物显示,11株耐EMB分离株中4株(36.4%)不被NlaⅢ消化;46例结核病痰标本中10例(21.7%)不被NlaⅢ消化.结论部分结核分枝杆菌耐EMB是由于embB基因突变所致,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法可直接快速测定结核病耐EMB分离株和痰标本中结核分枝杆菌耐EMB基因型.

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