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寡核苷酸骨架对CpG基元诱导人巨噬细胞释放细胞因子的影响

         

摘要

目的探讨不同寡核苷酸骨架对GG-寡核苷酸CpG ODNs导致小鼠死亡、诱导细胞因子释放能力的影响.方法实验前1h经腹腔注射600mg/kg D-氨基半乳糖敏化小鼠,采用磷酸硫化CpG-寡核苷酸(PsCpGODN)、Ps non-CpG ODN、磷酸二酯CpG-寡核苷酸(Po CpG ODN)和Po non-CpGODN腹腔注射小鼠,注射剂量为每只小鼠10nmol,观察7d内小鼠死亡率的差异.体外培养THP-1细胞系,在THP-1细胞培养体系中加入上述制剂后,37℃、5%CO2孵箱中培养20h后离心取上清,测定上清中TNF-a、IL-6、IL-12的浓度.同时观察CpGODN刺激THP-1细胞4h后TLR9的表达情况.结果 Ps CpGODN可诱导小鼠的死亡以及细胞因子的大量释放,而其它三种制剂则元此能力而且Ps CpG ODN诱导TNF-α释放的能力随浓度的增加而增加;CpG ODN导致的细胞TLR9的表达增加与细胞因子的释放密切相关.结论磷酸硫代骨架的CpGODN具有导致动物死亡和诱导巨噬细胞大量释放细胞因子的作用,磷酸二酯骨架的CpG ODN则无此能力.

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