海洋细菌有机磷酸酐水解酶在大肠杆菌中的分泌表达研究

肖运柱; 杨键; 张偲; 龙丽娟

首页> 中文期刊> 《生物加工过程》 >海洋细菌有机磷酸酐水解酶在大肠杆菌中的分泌表达研究

海洋细菌有机磷酸酐水解酶在大肠杆菌中的分泌表达研究

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

To realize the expression of recombinant marine bacterial organophosphorus acid anhydrolase OPAA4301 in Escherichia coli,we optimized fermentation production.Two factors,signal peptide and culture condition,were assumed critical in secretion of recombinant enzymes.Our results showed that detectable organophosphorus acid hydrolase was found in the culture supernatant of recombinant E.coli constructed without signal peptide at the N-terminal of the enzyme.Using the secretory expression level as target,we studied the effects of supplementation of inducer and glycine.The optimized concentrations of inducer and glycine were determined to be 0.8 mmol/L and 10 g/L.Under the optimized conditions,the cellular localization of recombinant enzyme was converted from intracellular to extracellular,and the extracellular enzyme expression level improved by 108.8 folds.The maximum extracellular enzyme activity reached 0.28 U/mL,which is the equivalent of 0.72 g/L for the production capacity of recombinant enzyme.Our study can provide theoretical basis for producing recombinant marine bacterial organophosphorus acid anhydrolase.%为了考察一种海洋细菌来源的有机磷酸酐水解酶OPAA4301在大肠杆菌中胞外分泌表达生产的可能性,笔者分别从信号肽和发酵条件两方面对该酶在大肠杆菌中的产量及细胞定位情况进行观测和优化.结果发现,海洋细菌有机磷酸酐水解酶OPAA4301在大肠杆菌中可不依赖信号肽少量分泌至培养基上清中.以胞外酶产量为指标,对诱导剂和甘氨酸添加量进行优化,确定适宜的诱导剂浓度为0.8 mmol/L,适宜甘氨酸添加量为10 g/L.在优化条件下,重组酶蛋白的细胞定位主要由细胞内转变为细胞外,胞外酶活提高108.8倍,达0.28 U/mL,相当于重组蛋白胞外生产能力为0.72 g/L.本研究为重组海洋细菌有机磷酸酐酶的工程化发酵生产提供理论基础.

著录项

来源
《生物加工过程》 |2017年第3期|1-6|共6页
作者
肖运柱; 杨键; 张偲; 龙丽娟;
展开▼
作者单位

中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室RNAM海洋微生物中心广东省海洋药物重点实验室,广东广州510301;

中国科学院大学,北京100049;

中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室RNAM海洋微生物中心广东省海洋药物重点实验室,广东广州510301;

中国科学院大学,北京100049;

中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室RNAM海洋微生物中心广东省海洋药物重点实验室,广东广州510301;

中国科学院大学,北京100049;

中国科学院南海海洋研究所热带海洋生物资源与生态重点实验室RNAM海洋微生物中心广东省海洋药物重点实验室,广东广州510301;

中国科学院大学,北京100049;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 Q851;
关键词
海洋细菌; 有机磷酸酐水解酶; 蛋白质分泌表达; 大肠杆菌; 甘氨酸;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 假单胞菌菌株ON-4a中的一个新型N—氨基甲酰—L—氨基酸酰胺水解酶：在大肠杆菌中表达的N—氨基甲酰—L—半胱氨酸酰胺水解酶的纯化和特性研究 Ohmachi T等Appl microbiol biotechnol，2004，65（6）：686．693 [J] . 宫倩 ,朱春宝 . 中国医药工业杂志 . 2005,第1期
2. 大肠杆菌O157中肽聚糖水解酶MpaA的克隆、表达、纯化及晶体学研究 [J] . 马银良 ,刘爽 ,崔亚琦 . 河北大学学报（自然科学版） . 2016,第004期
3. 海洋细菌低温葡萄糖氧化酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 [J] . 刘春莹 ,胡善松 ,张庆芳 . 食品与发酵工业 . 2019,第011期
4. 海洋细菌来源低温褐藻胶裂解酶的分泌表达和酶学性质研究 [J] . 张文彬 ,白露 ,刘彬 . 渔业科学进展 . 2021,第006期
5. 植物乳杆菌DPP8胆盐水解酶基因在大肠杆菌中的表达及其酶学性质 [J] . 丁轲 ,刘宁 ,段锦 . 动物营养学报 . 2020,第007期
6. 来源于玫瑰微球菌的麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因在大肠杆菌中的融合表达 [C] . 许雅琴 ,袁其朋 ,张欣 . 第五届全国制药工程科技与教学研讨会 . 2006
7. 大肠杆菌产有机磷水解酶的发酵工艺研究 [A] . 周凯琪 . 2019

海洋细菌有机磷酸酐水解酶在大肠杆菌中的分泌表达研究

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅