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卷枝毛霉孢子原生质体的制备与再生

         
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摘要

为了构建高产γ-亚麻酸的卷枝毛霉稳定遗传转化体系,利用酶解法对卷枝毛霉(Mucor circinelloides sp.)EIM-10的孢子进行原生质体制备.研究酶液组成、渗透压稳定剂、酶解温度、酶解时间等对卷枝毛霉孢子原生质体形成和再生的影响,建立了制备卷枝毛霉孢子原生质体的最适条件:1%纤维素酶和2%溶壁酶为酶解体系,0.5mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,酶解温度32℃,酶解时间2.5 h,再生培养基为0.5 mol/L NaCl高渗培养基.用双层平板培养法进行原生质体再生,在此条件下原生质体的形成量为1.2×106个/mL,再生率为70.5%.%To construct a stable genetic transformation system, the protoplasts of Mucor circinelloides sp.EIM- 10 spores were prepared by using enzymatic methods. The influences of enzyme system, osmotic pressure stabilizer, enzymolysis time, and temperature on the preparation and regeneration of the protoplasts of Mucor circinelloides sp. EIM-10 spores were studied. The optimum preparation conditions were established by using enzyme system composed of 1％ cellulase and 2％ lywallzyme with 0. 5 mol/L NaCl being used as osmotic pressure stabilizer at 32 ℃ for 2. 5 h. When regenerated,0. 5 mol/L NaCl was chosen as osmotic pressure stabilizer by using the double-decked culture medium. Under the conditions, the formation of protoplast was 1.2 × 106/mL and the regeneration rate was 70.5％.

著录项

  • 来源
    《生物加工过程》 |2011年第2期|49-52|共4页
  • 作者

    陈清霞; 江贤章; 刘锦清; 宋芬芬; 黄建忠;

  • 作者单位

    福建师范大学,生命科学学院,工业微生物教育部工程研究中心,福建省现代发酵技术工程研究中心,福州,350108;

    福建师范大学,生命科学学院,工业微生物教育部工程研究中心,福建省现代发酵技术工程研究中心,福州,350108;

    福建师范大学,生命科学学院,工业微生物教育部工程研究中心,福建省现代发酵技术工程研究中心,福州,350108;

    福建师范大学,生命科学学院,工业微生物教育部工程研究中心,福建省现代发酵技术工程研究中心,福州,350108;

    福建师范大学,生命科学学院,工业微生物教育部工程研究中心,福建省现代发酵技术工程研究中心,福州,350108;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 微生物学;
  • 关键词

    γ-亚麻酸; 卷枝毛霉; 原生质体; 孢子;

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