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人脐带间充质干细胞条件培养液对高糖诱导人腹膜间皮细胞-间充质转化的影响和机制

         
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目的 研究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchyma] stem cells,hUCMSCs)条件培养液(conditioned medium,CM)对高糖(high glucose,HG)诱导人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)发生上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其作用机制.方法 应用CCK-8法检测不同浓度葡萄糖(1.5％,2.5％,4.25％)和不同体积分数(5％,7.5％,10％,12.5％,15％)的间充质干细胞条件培养液(mesenchymal stem cells conditioned medium,MSC-CM)对HPMCs增殖的影响.实验分组:①对照组;②HG组(2.5％葡萄糖);③CM组(2.5％葡萄糖+7.5％MSC-CM),作用48h.光镜下观察HG和MSC-CM处理后HPMCs的形态学变化.应用Western blot检测HG和MSC-CM处理后HPMCs中EMT标志物以及Wnt/β-catenin通路蛋白的表达.结果 HG抑制HPMCs的增殖,MSC-CM促进HPMCs的增殖.光镜下,HG组细胞形态多数呈梭形改变,MSC-CM可以缓解HG引起的细胞形态学改变.与对照组相比,HG组中E-cadherin表达减少(t=-7.166,P=0.002),Vimentin和α-SMA表达升高(t值分别为3.748,3.430;P值分别为0.020,0.027),CM组可缓解HG引起的上述蛋白表达变化(t值分别为3.865,4.657,6.000;P值分别为0.018,0.010,0.004).与对照组相比,HG组上调Wnt/β-catenin通路中β-catenin蛋白的表达(t=3.341,P=0.029),CM组抑制HG诱导的β-catenin蛋白表达上调(t=3.808,P=0.019).结论 hUC-MSC-CM可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,缓解HG诱导HPMCs的EMT.

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