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5-氨基酮戊酸光动力疗法对宫颈癌细胞株凋亡的诱导作用

         

摘要

背景与目的:5-氨基酮戊酸-光动力疗法(5-aminolevulinic acidmediated photodynamic therapy,ALA-PDT)是近年来兴起的一种肿瘤消融新技术,其作用于宫颈癌细胞的机制尚不清楚。本课题探讨ALA-PDT对宫颈癌细胞凋亡的影响及其相关机制。方法:用MTT法检测ALA-PDT对8种人宫颈癌细胞增殖的影响,并筛选出ALA-PDT对宫颈癌细胞增殖影响的最佳作用参数。采用Annexin V-FITC/PI双染法、Hoechst33342染色法和May-Grünwald-Farbstoff Giemsa染色法检测ALA-PDT对Me180细胞凋亡的影响。采用PI染色结合流式细胞术分析ALA-PDT对Me180细胞周期的影响。采用实时荧光定量RT-PCR法检测ALA-PDT对Me180细胞survivin等基因mRNA的影响,Western blot检测对Survivin蛋白表达的影响。结果:8种人宫颈癌细胞株中,Me180细胞株对ALA-PDT最敏感,与其它细胞株比较差异有统计学意义。ALA2mmol/L、10J/cm2激光剂量孵育3h为ALA-PDT体外杀伤Me180细胞较理想的实验条件,在该条件下ALA的IC50为7.28×10-4mmol/L。ALA-PDT可显著诱导Me180细胞凋亡,并可将细胞阻滞于G0/G1期。ALA-PDT可显著抑制Me180细胞survivin基因的mRNA和蛋白表达。结论:ALA-PDT在体外对人宫颈癌Me180细胞有明显的增殖抑制作用,能诱导Me180细胞发生凋亡,其机理可能与抑制survivin基因表达有关。

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