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小鼠骨髓基质细胞的生物学特性及血管新生能力

         

摘要

目的 探讨体外培养的骨髓基质细胞的一些生物学特性及体内移植后在缺血区新血管生成中的作用。方法 分离 5~ 6周龄的小鼠胫骨、股骨 ,用预冷的DMEM/F12培养基冲洗出骨髓 ,经密度梯度离心分离出骨髓单个核细胞 ,接种后 12~ 16d形成单层贴壁的成纤维样细胞。体外诱导分化鉴定分离的细胞 ,用传代的细胞进行生长曲线测定 ,观察其接种贴壁率、分裂指数 ,检测细胞周期和超微结构 ,并建立下肢缺血模型。荧光标记的体外扩增的骨髓单个核细胞被移植入缺血组织。移植后 2周 ,荧光显微镜及内皮细胞碱性磷酸酶染色 ,检查荧光阳性细胞与染色阳性细胞的时空关系。结果 体外传代培养的单个核细胞倍增时间约为 4 2h。传代 10h贴壁率达 90 %以上。分裂指数曲线与生长曲线相似。细胞周期显示约 83%的细胞处于G1期。结论 体外培养的骨髓基质细胞生长稳定 ,传代后的细胞适应性强 ,增殖较快 ,表现出较早期细胞特点 ,在体外及移植入体内缺血区能分化为血管内皮细胞 ,有望用于改善组织缺血

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