乙醇诱导肝癌细胞凋亡及其单克隆抗体的制备

杨连君; 王文亮; 司晓辉

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乙醇诱导肝癌细胞凋亡及其单克隆抗体的制备

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目的：探讨原发性肝细胞癌（简称肝癌）细胞凋亡过程中相关分子的表达情况，制备抗肝癌凋亡细胞相关抗原的单克隆抗体（mAb）。方法：用含6%乙醇的培养液培养肝癌细胞系HCC-9204细胞6h诱导其凋亡，透射电镜观察细胞形态变化，TUNEL法检测细胞DNA片段化发生情况，流式细胞仪分析细胞DNA含量变化。环磷酰胺消减免疫法免疫小鼠。杂交瘤法制备抗凋亡细胞的mAb。ELISA法筛选在凋亡细胞高表达，而在非凋亡细胞低表达的mAb。有限稀释法连续克隆化。用免疫细胞化学ABC法进一步筛选和分析，并进行杂交瘤细胞染色体和免疫球蛋白（Ig）类型分析。结果：6％乙醇作用HCC-9204细胞6h后，可见明显的凋亡形态学变化，大部分细胞为TUNEL染色阳性，并且流式细胞仪检测可见亚二倍体凋亡峰。经连续克隆化筛选出1株在乙醇诱导凋亡的HCC-9204细胞的胞核高表达，而在未经诱导凋亡的HCC-9204细胞低表达的mAb。染色体分析结果符合mAb杂交瘤细胞特征，其Ig类型为IgG1。结论：低浓度乙醇诱导凋亡的HCC-9204肝癌细胞中有某些相关分子的表达升高。初步获得了1株可能是抗乙醇诱导的肝癌细胞凋亡相关抗原的mAb。

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来源
《临床与实验病理学杂志》 |2001年第3期|249-252|共4页
作者
杨连君; 王文亮; 司晓辉;
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作者单位

第四军医大学病理学教研室;

第四军医大学病理学教研室;

上海第二医科大学第九人民医院口腔医学研究所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类肝肿瘤;
关键词
凋亡; 抗体; 单克隆; 癌;

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