慢性乙型肝炎病毒感染者T淋巴细胞和NK细胞T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3表达与肝脏炎症和纤维化相关性分析

李静; 顾玉荣; 毕燕华; 黄月华

摘要

目的探究慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者T淋巴细胞及自然杀伤（NK）细胞T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3（Tim-3）表达及其在评估肝纤维化程度中的潜在价值。方法选取2016年6月1日至2018年6月1日于中山大学附属第三医院感染性疾病科门诊就诊的320例慢性HBV感染者, 将其分成免疫耐受期组（31例）, 免疫活动期组（184例）, 非活动期组（48例）和灰色区组（57例）;同时纳入17例健康志愿者作为健康对照组。分离每例研究对象外周血单个核细胞并采用流式细胞仪分别检测CD3+ T淋巴细胞及其亚群（CD4+和CD8+ T淋巴细胞）以及NK细胞及其亚群（NK-bright和NK-dim细胞）Tim-3表达频率和平均荧光强度（MFI）。收集患者临床资料并计算天冬氨酸转氨酶与血小板计数比值指数（APRI）。采用Kruskal-WallisH检验进行多组间非正态分布计量资料比较, 组间两两比较采用Mann-WhitneyU检验。计数资料采用例（百分数）表示, 采用卡方检验进行比较。相关性分析采用Spearman秩相关。采用受试者工作特征曲线（ROC）分析CD3+ T淋巴细胞与NK细胞Tim-3表达比值在评估慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者肝纤维化进展中的预测价值。P＆0.05为差异具有统计学意义。结果免疫耐受期、免疫活动期、非活动期、灰色区和健康对照组年龄、天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、白蛋白（Alb）、总胆红素（TBil）和肝脏硬度差异均有统计学差异（H=12.40、169.70、210.70、25.17、24.21和86.50, P值均＆0.05）。免疫耐受期、免疫活动期、非活动期和灰色区组APRI评分、乙型肝炎e抗原（HBeAg）阳性患者比例、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和HBV-DNA差异均有统计学差异（H=89.45、118.00和14.81, χ2=148.20, P值均＆0.05）。免疫耐受期、免疫活动期、非活动期、灰色区及健康对照组CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞以及NK细胞、NK-bright和NK-dim细胞Tim-3表达频率及MFI差异均有统计学意义（H=13.57、51.55、8.58、44.25、20.32、47.96和12.45、33.69、4.96、32.47、10.63、30.46, P值均＆0.05）。慢性HBV感染者CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI与ALT和AST水平均呈正相关（r=0.2134、0.4733、0.2090、0.4333、0.1771、0.4417、0.1780、0.3956、0.2618、0.4671、0.2614和0.4326, P值均＆0.05）;CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI以及CD3+和CD4+ T淋巴细胞Tim-3 MFI与TBil水平均呈正相关（r=0.1342、0.2635、0.2739和0.2526, P值均＆0.05）。慢性HBV感染者NK及NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI与ALT、AST和TBil水平均呈负相关（r=-0.2671、-0.4093、-0.2451、-0.4099、-0.1807、-0.1823、-0.2733、-0.4224、-0.2576、-0.4206、-0.1798和-0.1946, P均＆0.05）; NK-bright细胞Tim-3 MFI与ALT、AST和TBil水平均呈负相关（r=-0.3775、-0.3562和-0.1633, P值均＆0.05）;CD3+、CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI与肝脏硬度值均呈正相关（r=0.1789、0.3896、0.1518、0.3521、0.2117和0.3579, P值均＆0.05）;CD4+和CD8+ T淋巴细胞Tim-3表达频率和MFI以及CD3+ T淋巴细胞MFI与APRI评分均呈正相关（r=0.1487、0.2604、0.2296、0.4858和0.2853, P值均＆0.05）;NK和NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI以及NK-bright Tim-3 MFI与肝脏硬度值均呈负相关（r=-0.2686、-0.3975、-0.2852、-0.3991和-0.3531, P值均＆0.05）。NK和NK-dim细胞Tim-3表达频率和MFI以及NK-bright细胞Tim-3 MFI与APRI评分均呈负相关（r=-0.3589、-0.4158、-0.3591、-0.4108和-0.3966, P值均＆0.05）。CD3+ T淋巴细胞与NK细胞Tim-3表达比值预测慢性HBV感染者肝脏纤维化ROC曲线

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