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CYP3 A5基因检测质控品制备及其应用研究

         
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目的 通过构建体外质粒DNA作为质控样品开展他克莫司代谢基因——细胞色素P4503A5(CYP3A5)基因检测室间质量评价计划(简称室间质评),评估参评实验室检测能力及存在的问题,提高临床实验室CYP3A5基因的检测质量.方法利用基因工程技术体外构建含CYP3A5*3(rs776746)位点上、下游序列的重组质粒,筛选CYP3A5*3 AA和GG基因型分别作为野生型和突变型样品,两者等比例混合后作为杂合突变型样品,并制备质控样品盘开展室间质量评价.依据回报结果计算各实验室成绩,汇总不同样品的总体符合率,并分析不同检测方法的符合率和检测错误类型.结果体外构建的重组质粒经Sanger测序验证分别含CYP3A5*3位点野生型和突变型序列.2017年两次室间质评中成绩满分的实验室分别为93.33％(14/15)和100％(17/17).两次室间质评中,样品检测的总体符合率分别为96％(72/75)和100％(85/85).荧光分子杂交法检测的样品符合率均为100％;Sanger测序法检测样品符合率为90％(27/30)和100％(40/40).结论制备的质控样品能够有效监测试剂检测性能,具有良好的适用性.各实验室在CYP3A5*3基因位点检测总体准确率较高,但个别实验室检测能力有待提高.室间质评计划能帮助实验室发现检测中存在的问题,提高检测质量.

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