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Biglycan及血管内皮生长因子对结肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制

         
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目的:观察biglycan及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对结肠癌细胞系HCT116迁移、侵袭能力的影响并探讨其可能的机制.方法:在稳定转染biglycan的结肠癌细胞系HCT116中转染VEGF siRNA,实验设置未转染对照组(mock组)、空载质粒和非特异性干扰片段转染对照组(vector+ siRNA-NC组)、biglycan cDNA和非特异性干扰片段转染组(biglycan+ siRNA-NC组)以及biglycan cDNA和VEGF siRNA共转染组(biglycan+ siRNA-VEGF组).采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测biglycan和VEGF的mRNA表达;采用划痕实验检测细胞的迁移能力;采用Transwell法检测细胞的侵袭能力;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测SNAIL、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达;采用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性.结果:与mock组及vector+ siRNA-NC组比较,biglycan+ siRNA-NC组细胞的迁移、侵袭能力均显著提高(P＜0.05),vimentin、MMP-2、MMP-9、SNAIL蛋白的表达水平显著提高,E-cadherin蛋白的表达水平则显著下降(P＜0.05),MMP-2和MMP-9的活性显著提高(P＜0.05).与biglycan+ siRNA-NC组比较,biglycan+ siRNA-VEGF组细胞的迁移、侵袭能力均显著降低(P＜0.05),SNAIL、vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均显著下降,E-cadherin蛋白的表达水平显著提高(P＜0.05),MMP-2、MMP-9的活性显著下降(P＜0.05).结论:biglycan通过促进VEGF的表达来促进结肠癌细胞系HCT116的迁移和侵袭,下调结肠癌细胞中VEGF的表达可逆转biglycan对HCT116迁移和侵袭的促进作用.

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