重组腺病毒p53上调凋亡调控因子通过凋亡通路增强胶质瘤细胞对替莫唑胺敏感性的体外研究

刘晓东; 王宏勤; 苗旺; 赵和千; 范益民; 郝解贺

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目的探讨转染p53上调凋亡调控因子(PUMA)的人脑胶质瘤细胞对替莫唑胺敏感性增强的作用机制。方法将人脑胶质瘤细胞U87MG分为正常对照组、空载体组和实验组进行培养,分别将感染复数(MOI)=50的空载体腺病毒(Ad-△BH3)和携带PUMA的重组腺病毒(Ad-PUMA)转染U87MG细胞,转染后用MTT比色法测定各组细胞的存活率并计算替莫唑胺(TMZ)IC50,流式细胞仪检测细胞周期的变化,应用TUNEL法检测细胞的凋亡情况。Western blot检测凋亡相关蛋白p53、Bax的表达。结果外源性PUMA基因在Ad-PUMA转染U87MG48h后,随着时间延长,PUMA表达使U87MG细胞的增殖能力降低并诱导凋亡,转染24h、48h、72h的生长抑制率分别为17.3%、35.6%、43.3%,凋亡率分别为20.3%、31.4%、45.4%。正常对照组、Ad-PUMA、Ad-△BH3组细胞的TMZ IC50分别为(15.0±1.9)μmol/L、(2.3±0.1)μmol/L和(14.4±1.6)μmol/L。PUMA表达的U87MG细胞DNA合成受到抑制,周期阻滞在G2期;Western blot检测显示p53表达在各组中差异无统计学意义(P>0.05)、PUMA和Bax在实验组中表达较对照组强,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Ad-PU-MA转染可有效增强人脑胶质瘤细胞U87MG对TMZ的敏感性,抑制人脑胶质瘤细胞U87MG的增殖,通过诱导细胞G2期阻滞促进其凋亡,促凋亡机制不依赖于p53。

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来源
《中华临床医师杂志（电子版）》 |2011年第3期|29-32|共4页
作者
刘晓东; 王宏勤; 苗旺; 赵和千; 范益民; 郝解贺;
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作者单位

山西医科大学附属第一医院神经外科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类综合疗法;
关键词
神经胶质瘤; 细胞凋亡; PUMA基因; 替莫唑胺; 重组腺病毒;

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