熟地黄多糖调控lncRNA MEG3对碘乙酸钠致骨关节炎软骨细胞损伤的保护作用

杜晨飞; 韩磊; 范围; 李红旗; 郑福增

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目的探讨熟地黄多糖(RGP)调控长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)对碘乙酸钠(MIA)诱导的骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡的影响。方法培养大鼠软骨细胞,不同浓度MIA(0、1、2、4、8μmol/L)诱导建立软骨细胞损伤模型,并给予不同浓度RGP(50、100、200、400、800 mg/mL)处理筛选合适的实验浓度。实验分为正常组、MIA组、RGP组、RGP+si-NC组、RGP+si-MEG3组,Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测细胞活力;Hoechst 33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中MEG3、金属蛋白酶13(MMP-13)、Ⅱ型胶原α1(COL2A1)和蛋白聚糖(ACAN)mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、p-PI3K、丝/苏氨酸激酶(AKT)、p-AKT、BAX、BCL-2、caspase3蛋白表达水平。结果MIA以剂量依赖性方式降低软骨细胞活力,诱导细胞凋亡,并降低MEG3和COL2A1 mRNA、ACAN mRNA水平,升高MMP-13 mRNA水平(P<0.05)。100、200、400、800 mg/mL RGP可升高软骨细胞活力及MEG3水平(P<0.05)。与正常组相比,MIA组细胞活力、MEG3、COL2A1 mRNA、ACAN mRNA和p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、BCL-2蛋白水平降低,细胞凋亡率、MMP-13 mRNA和BAX、caspase3蛋白水平升高(P<0.05);与MIA组相比,RGP组细胞活力、MEG3、COL2A1 mRNA、ACAN mRNA和p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、BCL-2蛋白水平升高,细胞凋亡率、MMP-13 mRNA和BAX、caspase3蛋白水平降低(P<0.05);敲低MEG3可减弱RGP对MIA诱导的软骨细胞损伤的保护作用。结论RGP可促进软骨细胞ECM合成,并抑制细胞凋亡,减轻MIA诱导的软骨细胞损伤,其作用机制可能与上调MEG3表达,诱导PI3K/AKT通路活化有关。

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来源
《中国比较医学杂志》 |2023年第7期|92-99|共9页
作者
杜晨飞; 韩磊; 范围; 李红旗; 郑福增;
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作者单位

河南省中医院关节科;

河南中医药大学骨伤学院;

河南省中医院风湿病科;

河南省中医院创伤外科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类实验医学、医学实验;
关键词
熟地黄多糖; 长链非编码RNA; 母系表达基因3; 骨关节炎; 软骨细胞; 凋亡;

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