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miR-30b在高磷诱导的血管平滑肌细胞凋亡中的作用

         

摘要

目的 观察微小RNA30b(microRNA 30b, miR-30b)在高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)凋亡中的作用及机制。方法 体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为正常组和高磷组(给予10 mmol/Lβ-甘油磷酸盐刺激)。采用实时荧光定量PCR检测各组VSMCs miR-30b表达、Western blot法测定促凋亡基因BAX、抑凋亡基因Bcl-2的表达情况,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况、采用流式细胞法检测各组细胞的凋亡情况。为进一步验证miR-30b对VSMCs凋亡的影响,给与转染miR-30b的抑制物inhibitor-30b和类似物mimic-30b,观察VSMCs增殖和凋亡情况以及BAX、Bcl-2表达情况。结果 (1)高磷对VSMCs凋亡的影响:流式结果显示,高磷组VSMCs凋亡细胞显著增多(P<0.05);MTT结果显示,高磷组细胞增殖减少(P<0.05);高磷组BAX表达升高、Bcl-2表达降低(P<0.05);高磷组miR-30b的表达显著下降(P<0.05)。(2)miR-30b对VSMCs凋亡的影响:转染inhibitor-30b后VSMCs凋亡细胞显著增多(P<0.05);转染inhibitor-30b后MTT显示细胞增殖减少(P<0.05);转染inhibitor-30b后,BAX表达升高、Bcl-2表达降低(P<0.05);转染mimic-30b后VSMCs凋亡细胞显著减少(P<0.05);转染mimic-30b后,BAX表达降低、Bcl-2表达升高(P<0.05)。结论 高磷可以诱导细胞凋亡,其可能机制之一是高磷通过抑制miRNA-30b表达,进而促进凋亡基因BAX表达,降低抑凋亡基因Bcl-2表达,导致VSMCs发生凋亡。

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