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MnTMPyP通过抑制线粒体凋亡通路对百草枯诱导肺上皮细胞损伤的保护作用

         

摘要

目的 探讨MnTMPyP(Mn)通过抑制氧化应激和线粒体凋亡通路对百草枯(PQ)诱导肺上皮细胞损伤的保护作用.方法 体外培养人肺泡Ⅱ型上皮样细胞A549细胞,以超氧化物歧化酶(SOD)的模拟物Mn为干预因素.实验分为四组:①对照组:加入RPMI 1640培养液;②Mn组:加入Mn 10μmol/L;③PQ组:加入PQ 750 μmol/L;④PQ+Mn组:Mn 10 μmoVL预处理90min,再加入PQ 750 μmol/L.各组细胞处理24h后检测相关指标.MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位、活性氧(ROS);分光光度法检测Caspase-3;Western blotting检测线粒体凋亡蛋白Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果 与对照组比较,Mn组检测指标无统计学意义;PQ组细胞活性降低,细胞凋亡率增加有统计学意义(P<0.01),线粒体膜电位降低有统计学意义(P<0.01),ROS的产生显著增加,Caspase-3活性增高,Western blotting显示线粒体凋亡途径中抗凋亡蛋白Bcl-2表达量降低,促凋亡蛋白Bax表达增强.与PQ组比较,PQ+Mn组细胞活性增加,细胞凋亡率降低,线粒体膜电位增强,ROS的产生减少,Caspase-3活性降低,Western blotting显示Bcl-2蛋白表达量增强,Bax蛋白表达降低.结论 Mn有效减轻PQ诱导肺上皮细胞的损伤,其机制是和拮抗PQ引起的氧化应激诱导的线粒体凋亡途径有关.

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