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空气细颗粒物PM2.5对HaCaT细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响

         
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目的探讨空气细颗粒物PM2.5对HaCaT细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法收集北京市2015—2016年采暖季雾霾天气PM2.5, 制备成混悬液。将HaCaT细胞分为空白组（仅用细胞培养基）、对照组（不加PM2.5, 其他处理同实验组）和实验组[100 ～ 400 mg/L（细胞形态学观察和增殖实验用50 ～ 800 mg/L）PM2.5混悬液处理]处理24 h后, 倒置显微镜下观察细胞形态变化;CCK8法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡;Western印迹法检测细胞周期蛋白A2（cyclin A2）及细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）的表达水平。结果随着PM2.5浓度升高, HaCaT细胞形态逐渐发生改变, 细胞数目逐渐减少。与对照组（100 ± 4.95）%相比, 50 mg/L PM2.5组HaCaT细胞存活率无明显变化（P＆0.05）, 100、200、400、800 mg/L PM2.5组细胞存活率[分别为（91.77 ± 2.04）%、（80.01 ± 1.57）%、（57.80 ± 1.56）%、（21.98 ± 0.86）%]均显著下降（P＆0.05）。流式细胞仪检测显示, 与对照组相比, PM2.5组（100、200、400 mg/L）S期细胞比例逐渐增高, G2/M期细胞比例逐渐降低, 差异均有统计学意义（P＆0.05）。Western印迹法显示, 100、200、400 mg/L PM2.5组cyclin A2、CDK1蛋白表达均较对照组有所降低, 尤其以200 mg/L组降低最明显, 差异均有统计学意义（P＆0.05）。100、200、400 mg/L PM2.5组细胞总凋亡率分别为（9.98 ± 0.21）%、（12.56 ± 0.74）%、（16.74 ± 1.48）%, 与对照组（6.24 ± 0.17）%相比, 差异均有统计学意义（P＆0.05）。结论 PM2.5可能通过下调cyclin A2、CDK1表达水平诱导HaCaT细胞发生S期阻滞, 从而抑制细胞增殖, 促进HaCaT细胞凋亡。

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