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单纯疱疹病毒2gD基因的树突细胞疫苗免疫效应研究

         

摘要

目的观察单纯疱疹病毒2 gD(HSV-2 gD)基因的树突细胞(DC)疫苗在动物实验中诱发特异性免疫应答情况。方法用腺病毒介导的、HSV-2 gD基因修饰的DC(pAdeno-HSV-2 gD-DC)疫苗免疫BALB/c小鼠3次,末次免疫后第10天检测小鼠血清中gD IgG水平;同时,分离小鼠脾淋巴细胞,用HSV-2gD蛋白刺激,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖情况、乳酸脱氢酶释放法测定细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性及ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清中干扰素γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)水平。实验分为4组,pAdeno-DC组、pAdenoHSV-2 gD-DC组、DC组、空白对照组,每组10只。结果 pAdeno-HSV-2 gD-DC组小鼠血清内可检测到高滴度针对HSV-2gD蛋白的抗体(A50值为0.313±0.034),与pAdeno-DC组(0.034±0.009)、DC组(0.028±0.009)、空白对照组(0.026±0.010)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。pAdeno-HSV-2 gD-DC可以诱导小鼠脾淋巴细胞增殖(刺激指数为1.600±0.215)、有效杀伤靶细胞(CTL活性为37.1%),与pAdeno-DC组(分别为1.063±0.070和16.0%)、DC组(1.056±0.063和14.9%)、空白对照组(1.020±0.051和15.7%)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。pAdeno-HSV-2 gD-DC组小鼠分离的脾细胞培养上清可以检测到高水平IFN-γ(A450值为0.568±0.031)和IL4(A450值为0.544±0.043),与pAdeno-DC组(0.266±0.021和0.278±0.037)、DC组(0.271±0.023和0.275±0.044)、空白对照组(0.252±0.012和0.245±0.051)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论构建的pAdeno-HSV-2 gD-DC疫苗可以在小鼠中产生较强的特异性免疫应答。

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