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A375细胞外信号调节激酶通路与核因子κB通路的交互作用初探

         
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目的探讨黑素瘤细胞A375细胞外信号调节激酶（ERK）通路与核因子κB（NF-κB）信号转导通路的交互作用。方法将培养的A375细胞分为对照组、选择性ERK信号通路抑制剂U0126（10μmol/L、5μmol/L）处理组和选择性NF-κB通路抑制剂BMS-345541（10μmol/L、5μmol/L）处理组,分别提取蛋白质和mRNA,用Western印迹、RT-PCR观察U0126抑制ERK通路后,NF-κB P65、p-IκBα蛋白及NF-κB P65mRNA的表达,观察BMS-345541抑制NF-κB通路后ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达。结果应用10μmol/L、5μmol/L U0126抑制ERK通路后,胞核NF-κB P65蛋白表达（分别为0.60±0.04、0.56±0.06）均较对照组（1.54±0.15）减少（P＜0.01）,其表达量与药物浓度无显著相关性（P＞0.01）;p-IκBα蛋白的表达（0.90±0.05、0.70±0.02）均较对照组（0.61±0.03）增加（P＜0.01）,两药物浓度组之间的表达量差异有统计学意义（P＜0.01）;NF-κB P65 mRNA的表达（0.79±0.05,0.75±0.04）均较对照组（0.86±0.05）减少（P＜0.01）。应用10μmol/L BMS-345541抑制NF-κB通路后,ERK1/2、p-ERK1/2蛋白及ERK1 mRNA的表达（0.73±0.07、0.75±0.09、1.51±0.02）较对照组减少（P＜0.01）,BMS-345541浓度为5μmol/L时,ERK1/2、p-ERK1/2蛋白和ERK1 mRNA的表达（0.94±0.11、0.99±0.04、1.62±0.03）较对照组的差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论 NF-κB通路和ERK通路在黑素瘤A375细胞中存在交互作用。

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