单纯疱疹病毒包膜糖蛋白gC合成及验证

张宇; 姚煦; 顾汉艳; 王宝玺; 刘军

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单纯疱疹病毒包膜糖蛋白gC合成及验证

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目的利用基因工程技术表达单纯疱疹病毒（HSV）包膜糖蛋白（gC）并进行验证。方法分两段合成gC蛋白,分别合成基因GC-F和GC-R,并分别将基因亚克隆进pSumo-Mut（含Stu I和Xho I酶切位点）和pCzn1（含Nde I和XhoI酶切位点）表达载体,获得pSumo-Mut-GC-F和pCzn1-GC-R质粒。将两重组质粒转化ArcticExpressTM（DE3）原核宿主菌,异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达目的蛋白,经Ni柱亲和纯化,最终获得高纯度蛋白。采用Western印迹法检测重组GC-F和GC-R两段蛋白与HSVIgG的结合情况。结果应用全基因合成方法获得GC-F和GC-R基因片段,经SDS-PAGE鉴定分析,主要分布于沉淀层,经亲和层析后获得的蛋白纯度在80%以上,并可被人抗HSV-1抗体（IgG）阳性血清识别。结论利用基因工程技术构建融合表达载体,并经IPTG诱导成功表达gC蛋白,与HSV-1感染血清反应阳性,是后续进行功能研究的理想实验材料。

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来源
《中华皮肤科杂志》 |2014年第8期||共页
作者
张宇; 姚煦; 顾汉艳; 王宝玺; 刘军;
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作者单位

1. 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所 2. 南京大学医学院附属鼓楼医院皮肤科;

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正文语种 chi
中图分类 R752.11;
关键词
湿疹; 单纯疱疹病毒属; 包膜糖蛋白;

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