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竹节香附素A通过ULK1/Atg13及ROS途径调控肝癌细胞自噬的作用研究

         
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目的 探讨竹节香附素A通过自噬激活激酶1(ULK1)/自噬相关蛋白13(Atg13)及活性氧(ROS)途径调控肝癌细胞自噬的作用.方法 2019年8—9月于开滦总医院实验室进行实验,设肝癌HepG2细胞组、5-氟尿嘧啶组(80 mg/μl)、竹节香附素A低剂量组(100 mg/μl)、竹节香附素A高剂量组(200 mg/μl),4组每孔设6个平行样,培养72 h,培养结束后,测定细胞存活率、自噬、凋亡率,检测ULK1、Atg13 mRNA和蛋白水平,2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)测定ROS水平.结果 与肝癌HepG2细胞组比较,5-氟尿嘧啶组及竹节香附素A低、高剂量组HepG2细胞OD值、存活率降低(P<0.01),自噬小体、HepG2细胞凋亡率、ULK1、Atg13 mRNA和蛋白表达、ROS水平升高(P<0.01);与5-氟尿嘧啶组比较,竹节香附素A低、高剂量组细胞OD值、存活率升高(t/P=21.214/0.000、19.547/0.000、18.547/0.000、25.478/0.000),自噬小体、凋亡率、ULK1、Atg13 mRNA和蛋白表达水平、ROS水平降低(t/P=16.325/0.000、22.547/0.000、9.874/0.000、16.589/0.000、13.654/0.000、14.654/0.000、16.589/0.000、21.247/0.000、21.687/0.000、18.324/0.000、18.541/0.000、19.587/0.000、19.654/0.000、24.052/0.000);与竹节香附素A低剂量组比较,竹节香附素A高剂量组细胞OD值、存活率降低(t/P=16.547/0.000、23.547/0.000),自噬小体、凋亡率、ULK1、Atg13 mRNA和蛋白表达水平、ROS水平升高(t/P=15.696/0.000、10.654/0.000、14.697/0.000、18.324/0.000、17.024/0.000、19.634/0.000、18.547/0.000).结论 竹节香附素A能明显抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞自噬及凋亡;其机制与竹节香附素A激活ULK1/Atg13及ROS通路有关.

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