慢病毒介导Yes相关蛋白基因过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞增殖

张雪; 郝长宁; 严泽振; 陈佳全; 吴圣俊; 曾庆坛; 阚科佳; 张岚

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目的探讨慢病毒介导Yes相关蛋白（YAP）过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞（miPSC-EC）增殖的机制。方法诱导小鼠诱导性多能干细胞（miPSC）为内皮细胞（EC）,慢病毒介导质粒pPGK-2Flag-YAP转染miPSC-EC,嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株miPSC-EC/YAP。Western blot验证YAP是否成功转染miPSC-EC,并检测转染YAP后miPSC-EC内人第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）等蛋白的表达,同时应用噻唑蓝（MTT）比色法检测YAP对miPSC-EC增殖的影响。结果 miPSC诱导分化所得细胞形态符合EC特征,几乎都表达EC标志血小板内皮细胞黏附分子（CD31）。Western blot结果显示,转染YAP的miPSC-EC中YAP高表达（未转染细胞YAP几乎不表达）,miPSC-EC/YAP组较未转染组PTEN相对表达量明显降低（0.635±0.017比0.879±0.034,P=0.023）,p-Akt/相对表达量显著升高（0.450±0.025比0.073±0.018,P=0.007）。同步化之后24、48、72 h,miPSC-EC/YAP组吸光度（A）值较未转染组显著增加（0.113±0.004比0.077±0.004,P=0.000;0.368±0.010比0.199±0.006,P=0.000;0.716±0.004比0.418±0.018,P=0.000）。结论成功诱导miPSC为EC,建立过表达YAP的细胞株miPSC-EC/YAP。过表达YAP抑制PTEN的表达,提高Akt磷酸化。YAP可能通过参与磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路促进miPSC-EC的增殖。

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来源
《中华实验外科杂志》 |2017年第5期||共页
作者
张雪; 郝长宁; 严泽振; 陈佳全; 吴圣俊; 曾庆坛; 阚科佳; 张岚;
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作者单位

上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科;

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正文语种 chi
中图分类骨髓移植;
关键词
Yes相关蛋白; 诱导性多能干细胞; 内皮细胞; 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B;

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