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转染细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白基因的同供体大鼠树突状细胞对胰岛移植物存活的影响

摘要

目的探讨转染细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(转染CTLA4Ig基因)的同供体大鼠DC细胞对同种大鼠胰岛移植的影响.方法链尿菌素(STZ)60 mg/kg体重腹腔内注射制作SD大鼠糖尿病模型,胶原酶法分离、Ficoll 400密度梯度离心法纯化胰岛,GM-CSF+IL-4诱生培育的方法,获得高纯度的DC,含目的基因CTLA4Ig重组腺病毒AdvCTLA4Ig,转染同供体DC细胞,与胰岛细胞同时移植于糖尿病受体大鼠肾包膜下,免疫组织化学、Dot-ELISA、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CTLA4Ig基因在实验组和对照组DC细胞中的表达,并检测受体大鼠的血糖浓度变化,同时观察受体存活情况.结果实验组DC细胞有CTLA4Ig表达,而对照组DC细胞没有CTLA4Ig表达,实验组正常血糖维持时间(17.3±2.4)d较对照组(10.1±1.5)d、空白对照组(8.3±1.2)d显著延长,实验组、对照组和空白对照组受体大鼠存活天数分别为(34.5±3.4)d、(14.7±2.3)d和(11.2±1.4)d,实验组高于对照组(P<0.01).结论表达CTLA4Ig基因的DC细胞可能诱异胰岛移植免疫耐受,延长胰岛移植物的存活时间.

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