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首页> 中文期刊> 《水产学杂志》 >草鱼肌纤维原代培养的适宜培养基筛选

草鱼肌纤维原代培养的适宜培养基筛选

         
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原代培养的细胞离体时间短，生物学性状和体内细胞相似，为研究生物体的正常生理学和生物化学性质、化合物对生物体的作用等提供了模型系统。探讨不同培养基对草鱼肌纤维的培养效果，筛选出适合草鱼肌纤维原代培养的培养基，可为后期草鱼肌纤维原代培养研究提供参考。分别选用DMEM、M199、L-15三种培养基采用组织块法培养草鱼肌纤维，在倒置显微镜下观察不同培养基对草鱼肌纤维生长状态和细胞形态、细胞迁出时间和细胞达到首次传代时间的影响；采用细胞计数法计算不同培养基对细胞增殖情况以及细胞贴壁率的影响；用MTT比色法测定不同培养基对细胞活力的影响。与DMEM和L-15相比，M199培养基培养的草鱼肌纤维从组织块中开始迁出时间短（P＜0.05），细胞贴壁率高，2 h细胞贴壁率高达（44.60±11.46）%（P＜0.05），而DMEM、L-15培养基培养的细胞2 h贴壁率分别为（33.25±8.35）%、（22.83±0.70）%（P＜0.05）；同时M199组的细胞增殖速度快，进入对数生长期仅需72 h，且传代培养72 h后的草鱼肌纤维平均扩增倍数最高（P＜0.05）;MTT法测细胞活力发现，M199培养基培养的草鱼肌纤维平均OD值为1.03±0.17显著高于DMEM和L-15组的OD值（分别为0.06±0.02和0.05±0.02）。综上M199培养基对于草鱼肌纤维的生长具有较好的促进作用，该培养基中的生长增殖速率均明显高于DMEM和L-15培养基，且肌纤维贴壁和伸展状态更好。M199培养基可作为草鱼肌纤维原代培养的培养基。

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