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基于重组质粒制备STR分型阳性参照物

         
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Objective To prepare a new type of positive reference material for forensic STR genotyping.Methods This positive reference material was prepared with recombinant plasmids and employed the STR genotypes of 9948 human genomic DNA.The recombinant plasmids were diluted and mixed at equal proportions.This positive reference material covers 40 autosomal STR loci,22 Y-STR loci and the sex-determining locus Amelogenin.To evaluate this positive reference material,it was applied to five different multiplex STR systems,which were AmpFSTR(R) Identifiler(R)Plus,DNATyper(R)19,DNATyper(R)24,DNATyper(R)Y and PowerPlex(R)18D.Results The optimal plasmid concentration for STR genotyping was determined to be 0.01pg/μL～0.001pg/μL.The positive reference material worked well in all five STR systems with all loci genotyped.All typing results were correct and the peak heights were equivalent.Conclusion This positive reference material based on the recombinant plasmids works well with diverse STR systems and exhibits significant value for forensic DNA analysis.%目的 基于重组质粒制备可用于校准法医STR分型的阳性参照物.方法 以常用阳性参照物9948人类基因组DNA STR分型为依据,基于重组质粒构建包含CSF1PO、D7S820、TH01等40个常染色体位点,DYS391、DYS522、DYS385a/b等22个Y染色体位点以及性别判定基因座Amelogenin的STR分型阳性参照物.将重组质粒定量、稀释后等比例混合,分别应用于DNATyper(R) 19、DNATyper(R)24、DNATyper(R)Y、AmpF(R)STR Identifiler(R) Plus以及PowerPlex(R)18D System五种扩增试剂盒.结果 阳性参照物中各重组质粒浓度为0.0 1pg/μL～0.001pg/μL;应用于AmpF￡STR(R) Identifiler(R) Plus PCR扩增试剂盒,基于重组质粒制备的阳性参照物与人类基因组DNA扩增检测结果差异较小;将此阳性参照物分别应用于不同公司、不同STR基因座的四种STR扩增试剂盒,电泳检测图谱显示各基因座基因型完整,分型正确,峰高相当,基因座间均衡性良好.结论 基于重组质粒制备STR分型阳性参照物,是一种可以替代细胞系制备阳性参照物的方法,具有一定的参考价值.基于此方法制备的阳性参照物可适用于市面上常用的STR检验试剂盒,普适性较强,对法医DNA分型检测有一定的实用价值.

著录项

  • 来源
    《中国法医学杂志》 |2017年第2期|128-132|共5页
  • 作者

    武波; 梁景青; 王乐; 郭磊; 王峰; 陈曼; 刘毅成; 白雪; 莫晓婷; 叶健;

  • 作者单位

    山西医科大学法医学院;

    山西太原030001;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

    山西医科大学法医学院;

    山西太原030001;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

    安庆市公安局刑警支队;

    安徽安庆246000;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

    法医遗传学公安部重点实验室北京市现场物证检验工程技术研究中心公安部物证鉴定中心;

    北京100038;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 法医物证检验学;
  • 关键词

    法医物证学; 短串联重复序列; 重组质粒; 阳性参照物;

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