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压力循环技术用于人指甲DNA提取及方法学评价

         
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目的 将压力循环技术(PCT)用于指甲DNA提取,并对方法学进行评价.方法 收集10份人指甲样本,剪碎约为1mm×1mm大小,采用10％漂白粉水,10％ SDS,10％漂白粉水,无菌水清洗样本.10份样本各分成两组,1组用压力循环技术处理,另1组不作处理,提取DNA经复合扩增并进行STR分型检测,用于评价压力循环技术的作用.取5份指甲样本用血浸泡,5份用去离子水浸泡,之后采用上述清洗方法各清洗1～3次,收集各次清洗用的无菌水提取DNA,经STR分型检测,用于评价清洗对去除外源性DNA的效果.结果 10份经压力循环技术处理的样本中有7例比相应未经处理样本DNA提取量更高,但两组进行统计学处理,差异不具有统计学意义(P＞0.05);两组样本中提取DNA含量在0.026 ng以上的样本均得到完整的STR分型,与相应口腔拭子样本对照准确无误.血污染和非血污染样本清洗二次以上,均可避免外源性DNA的污染.结论 使用压力循环技术并配合本文清洗方法,可有效提高人指甲DNA的提取效率,并避免外源性生物DNA的干扰,保证DNA分型结果的准确.

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