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荧光STR直接复合扩增试剂缓冲体系的研制

         

摘要

目的 研制适用于数据库样本荧光STR直接复合扩增体系.方法 针对常规血卡、FTA和903血卡样本,配制扩增缓冲液基准母液,采用不同配方的扩增缓冲体系进行直接扩增及检测.考察不同种类增强剂、4种商业化DNA聚合酶、不同复性温度和终延伸时间对检材的检测效果,并验证优化体系的适应性.结果 采用本文所建体系对各类血卡样本进行检验,均可获得样本清晰、完整的STR分型.体系选择BSATween20\DMSO\甘油等增强剂组合、Typer热启动聚合酶1.5U/10μL、57 ~59℃复性温度、30 ~50min终延伸时间,采用10μL体系即可对直径1.2mm FTA卡血样进行有效分型.结论 本文所研制的缓冲体系能够满足常规血卡、FTA和903血卡样本直接扩增检验的需要.

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