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重组腺病毒p21转染人毛乳头细胞的模型构建

         
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摘要

目的 确定重组腺病毒p21(rAd5-CDKN1A-1p2 shRNA)在人毛乳头细胞(HDPCs)转染中的转染效率及最佳滴度.方法 采用携带绿色荧光蛋白(GFP)分子的重组腺病毒rAd5-CDKN1A-1p2 shRNA确定DPCs对腺病毒的敏感性;以不同感染系数(MOI)值稀释rAd5-CDKN1A转染DPCs并通过荧光显微镜及3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色检测每组细胞的转染效率及增殖效率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法证实rAd5-CDKN1A转入DPCs后p21基因沉默目的达到.结果rAd5-CDKN1A转染DPCs在MOI为100~500的转染效率均大于95%,当MOI为100、200和500时,各组转染效率升高不明显且差异无统计学意义(P>0.05);MOI=200及MOI=500组对DPCs细胞的增殖抑制效果明显(P<0.05);而MOI=100组对DPCs细胞增殖促进效果显著(P<0.05),MOI=25和MOI=50组对DPCs细胞增殖无明显作用;rAd5-CDKN1A转染后的DPCs较正常DPCs中p21基因的mRNA表达明显减弱.结论 成功构建重组腺病毒转染DPCs的模型,并确立了最佳转染滴度:MOI=100,获得较高且稳定的转染效率.

著录项

  • 来源
    《中国老年学杂志》 |2018年第4期|884-887|共4页
  • 作者

    张国强; 易娟; 赵璐; 程毅; 高顺强;

  • 作者单位

    河北医科大学第四医院皮肤科,河北 石家庄 050011;

    河北医科大学第四医院皮肤科,河北 石家庄 050011;

    河北医科大学第四医院皮肤科,河北 石家庄 050011;

    河北医科大学第四医院皮肤科,河北 石家庄 050011;

    河北医科大学第四医院皮肤科,河北 石家庄 050011;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 皮肤病学;
  • 关键词

    毛乳头; 转染; 腺病毒;

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