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miR-365-3p靶向PTEN调控骨关节软骨细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭

         

摘要

目的 探讨miR-365-3p对骨关节软骨细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭影响及作用机制.方法 以正常人软骨组织为对照,qRT-聚合酶链反应(PCR)检测骨关节炎患者软骨组织中miR-365-3p表达水平.分离培养骨关节软骨细胞,分别转染miR-365-3p模拟物(miR-365-3p组)和模拟对照(miR-NC组)后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关x蛋白(Bax)、钙黏附蛋白-E(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-2蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-365-3p与张力蛋白同源基因(PTEN)的靶向关系.结果 与正常对照组比较,骨关节炎患者软骨组织中miR-365-3p表达水平显著升高(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-365-3p组软骨细胞增殖抑制率、凋亡率及细胞中p21、Bax和E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05),迁移细胞数和侵袭细胞数及CyclinD1、Bcl-2和MMP-2蛋白表达显著降低(P<0.05).miR-365-3p靶向负调控PTEN表达,过表达PTEN逆转了过表达miR-365-3p对软骨细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响.结论 miR-365-3p负调控PTEN表达抑制骨关节软骨细胞增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡.

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