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miR-105-5p靶向THBS1调节神经炎症和神经元凋亡参与阿尔茨海默病进展

         

摘要

目的 探讨微小RNA-105-5p(miR-105-5p)在阿尔茨海默病(AD)中的作用和机制.方法 使用 β-淀粉样蛋白(Aβ25~35)处理PC12细胞,构建AD体外模型.实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p、THBS1 mRNA的表达.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β水平.CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡,观察敲低miR-105-5p或THBS1对细胞增殖、凋亡及炎症反应的影响.StarBase在线数据库和双荧光素酶报告基因实验验证miR-105-5p与THBS1之间靶向关系.Western印迹检测敲低miR-105-5p对THBS1蛋白表达量的影响.结果 与对照组miR-105-5p的表达水平(1.011±0.127)相比,模型组(1.731±0.070)显著上调(P0.05);与NC mimic组相比,miR-105-5p的过表达可显著降低THBS1在AD细胞模型中的蛋白水平(P<0.05),miR-105-5p inhibitor+si-THBS1组TNF-α及IL-1β水平显著高于miR-105-5p inhibitor+si-NC组(P<0.05),与miR-105-5p inhibitor+si-NC组相比,miR-105-5p inhibitor+si-THBS1组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),转染48 h后,miR-105-5p inhibitor+si-THBS1组细胞活力显著降低(均P<0.05).结论 miR-105-5p通过靶向THBS1调控AD体外模型中细胞增殖、凋亡及炎症反应.

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