抗CD20scFv/CD80/CD28/ξ重组基因修饰T细胞的构建与靶向杀伤效果

胡永仙; 俞康; 谭映霞; 沈志坚; 江松福; 钱红兰; 梁彬; 单大铭

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目的构建表达抗CD20scFv/CD80/CD28/ξ重组基因修饰T细胞,体外观察其特异性清除CD20+淋巴瘤细胞的能力,为肿瘤的过继免疫治疗提供新思路。方法采用DNA重组技术将pBULLETh上的CD28-ξcDNA插入到已含有抗CD20scFv/CD80的真核表达载体pLNCX质粒上,转染PA317包装细胞,挑取高滴度的包装细胞收获病毒,用收获的病毒感染刺激分裂的人外周血T淋巴细胞,经C418筛选1周后与CD20+淋巴瘤细胞株Daudi、Raji在体外共同培养,用非放射性的细胞杀伤试剂盒和ELISA检测试刹盒分别检测T细胞的抗原特异性杀伤和细胞因子分泌的功能。结果酶切及测序鉴定均证实pLNCX/抗CD20scFv/CD80/CD28/ξ构建成功,重组基因修饰的T细胞能在体外杀伤CD20+淋巴瘤细胞株Daudi、Raji,而对CD20细胞株K562无杀伤作用,同时CD20+靶细胞组上清液中IL-2和IFN-γ水平与CD20-组相比明显升高。结论重组基因修饰的CD20靶向性T细胞构建成功。该T细胞在体外能特异性杀伤CD20+淋巴瘤细胞株。

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来源
《中华血液学杂志》 |2007年第2期||共页
作者
胡永仙; 俞康; 谭映霞; 沈志坚; 江松福; 钱红兰; 梁彬; 单大铭;
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作者单位

1. 温州医学院附属第一医院 2. 美国Bio-Rad生物技术公司临床实验室;

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正文语种 chi
中图分类筋腱、韧带、滑囊疾病及损伤;
关键词
T细胞受体; T淋巴细胞; 肿瘤免疫治疗;

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