肝素诱导的树突状细胞上调Toll样受体3促进慢性乙型肝炎患者外周血Th0向Th1分化

孙伟红; 魏晓芳; 赵鹏; 牛爱荣; 李长优; 高岱清

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目的探讨肝素体外诱导的树突状细胞（DC）促进慢性乙型肝炎（CHB）患者CD4+T细胞亚群由Th0向Th1分化的机制。方法分离CHB患者外周血单个核细胞, 以重组人白细胞介素（rhIL）-4、重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）和肝素诱导培养DC。流式细胞仪和定量PCR检测肝素处理及未处理的DC中Toll样受体（TLRs）分子表达水平。对高表达的TLRs,用TLRs-siRNA干扰处理后检测DC的功能变化。免疫磁珠分离外周血CD4+T细胞亚群。酶联免疫吸附（ELISA）法检测Poly（I∶C）和R848刺激后DC上清液中IL-12及DC和CD4+T细胞混合培养上清液中干扰素（IFN）γ和IL-4的含量。均数的比较采用配对t检验。结果肝素处理的DC（heparin-DC）其TLR3表达水平明显高于未处理的DC （t = 2.849, P ＆ 0.05;t = 3.027, P ＆ 0.05）;而两组间TLR7和TLR8的表达水平差异无统计学意义;Heparin-DC在Poly（I∶C）刺激下分泌IL-12水平明显高于未处理的DC（t = 8.68, P ＆ 0.01）, 同时高于R848刺激的heparin-DC（t = 19.01, P ＆ 0.01）;经TLR3-siRNA干扰后, heparin-DC分泌的IL-12水平明显降低（t = 31.49, P ＆ 0.01）。TLR3-siRNA干扰后的heparin-DC与同种异体的CD4+T细胞共培养,其CD4+IFNγ+T细胞比例与未干扰组相比明显降低（1.64%±0.57%对比6.31%±0.88%, P ＆ 0.01）, 同时其上清液中Th1型细胞因子IFNγ的水平也显著降低（t = 20.83, P ＆ 0.01）, 而IL-4分泌水平变化无统计学意义。结论肝素在体外可能通过上调CHB患者树突状细胞TLR3的表达水平而促进外周血Th0向Th1细胞的分化。

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来源
《中华肝脏病杂志》 |2015年第9期||共页
作者
孙伟红; 魏晓芳; 赵鹏; 牛爱荣; 李长优; 高岱清;
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作者单位

1. 青岛大学医学院第二附属医院生物治疗中心 2. 青岛大学医学院第二附属医院检验科;

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正文语种 chi
中图分类 R512.62;
关键词
肝炎; 乙型; 慢性; Toll样受体3; 肝素; 树突状细胞; Th1;

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